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Cellules CCRF-CEM
Tissu
Sang périphérique
Maladie
Leucémie
Synonymes
CCRF/CEM, CCRFCEM, CCRF.CEM, CCRF CEM, CCRF, CEM, CEM-CCRF, CEM-CCRF (CAMR), CCRF/CEM/0, CEM/0, CEM-0, CCRF-CEM/S, GM03671, GM03671C

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Cellules CCRF-CEM

Cell line · Référence du produit 300147

Les cellules CCRF-CEM sont un type de lymphoblastes T humains couramment utilisés dans la recherche en immuno-oncologie et en immunologie. Ces cellules ont été isolées à partir du sang périphérique…

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules CCRF-CEM sont un type de lymphoblastes T humains couramment utilisés dans la recherche en immuno-oncologie et en immunologie. Ces cellules ont été isolées à partir du sang périphérique d'une femme caucasienne de 4 ans atteinte d'une leucémie lymphoblastique aiguë (LLA).

Les CCRF-CEM se développent en suspension et peuvent atteindre une densité cellulaire élevée lorsqu'elles sont cultivées dans des flacons à rotation. L'analyse du caryotype des cellules CCRF-CEM a montré un nombre modal de 47 chromosomes, allant de 41 à 95. Elles ne présentent pas de perte ou de gain systématique de chromosomes spécifiques ni de chromosomes marqueurs. Cependant, 28% des cellules avec 45 chromosomes présentaient un C- et 53% de toutes les cellules avaient un D supplémentaire, et 35% avaient un F supplémentaire.

Les cellules CCRF-CEM sont tumorigènes et peuvent provoquer des tumeurs chez les hamsters syriens. Ces cellules expriment les gènes et les antigènes CD3, CD5, CD7 et CD4. En outre, l'analyse des isoenzymes a montré ADA, 1 ; ES-D, 1 ; G6PD, B ; GLO-I, 1 ; PEP-D, 1 ; PGD, C ; PGM1, 1 ; PGM3, 0. Ces cellules ne contiendraient pas de particules virales, comme l'a montré la microscopie électronique.

Une étude a montré que la combinaison du resvératrol et de la prednisolone induit l'apoptose dans les cellules CCRF-CEM de manière dépendante du temps et de la dose. Le traitement combiné a montré des effets synergiques sur la surexpression de BAx et la régulation à la baisse de BCL2.

Tissu
Sang périphérique
Maladie
Leucémie
Synonymes
  • CCRF/CEM
  • CCRFCEM
  • CCRF.CEM
  • CCRF CEM
  • CCRF
  • CEM
  • CEM-CCRF
  • CEM-CCRF (CAMR)
  • CCRF/CEM/0
  • CEM/0
  • CEM-0
  • CCRF-CEM/S
  • GM03671
  • GM03671C

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Suspension
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Cellules polymorphes, gros noyaux, formation de microvillosités
Type de cellule
Lymphoblaste T
Tumorigène
Oui, sur des souris nues
Statut de ploïdie
Aneuploïde
État du MSI
Instable (MSI)
Temps de doublement
24 heures

04Identifiants

Référence
CCRF-CEM (numéro de catalogue Cytion 300147)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0207

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
P53 négatif
Expression des antigènes
CD3 B (37%), CD4 (50%), CD5 (95%), CD7 (77%)
Isoenzymes
G6PD, B
Virus
EBV négatif
Transcriptase inverse
Négatif

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS inactivé à la chaleur
Repiquage
Entretenez les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu. Démarrez les cultures avec une densité de 5 x 105 cellules/ml et maintenez la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 x 105 et 1 x 106 cellules/ml pour une croissance optimale.
Densité de semis
Démarrer de nouvelles cultures à 1 x 105 cellules/ml
Renouvellement des fluides
Tous les 3 jours
Récupération après le dégel
Laisser les cellules se remettre de la congélation pendant au moins 48 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
4 ans
Origine ethnique
Caucasien