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Cellule CCRF-CEM
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia
Sinonimi
CCRF/CEM, CCRFCEM, CCRF.CEM, CCRF CEM, CCRF, CEM, CEM-CCRF, CEM-CCRF (CAMR), CCRF/CEM/0, CEM/0, CEM-0, CCRF-CEM/S, GM03671, GM03671C

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Cellule CCRF-CEM

Cell line · Codice prodotto 300147

Le cellule CCRF-CEM sono un tipo di linfoblasti T umani comunemente utilizzati nella ricerca in campo immuno-oncologico e immunologico. Queste cellule sono state isolate dal sangue periferico...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule CCRF-CEM sono un tipo di linfoblasti T umani comunemente utilizzati nella ricerca immuno-oncologica e immunologica. Queste cellule sono state isolate dal sangue periferico di una donna caucasica di 4 anni affetta da leucemia linfoblastica acuta (ALL).

Le CCRF-CEM crescono in sospensione e possono raggiungere un'elevata densità cellulare quando vengono coltivate in fiasche di spinner. L'analisi del cariotipo delle cellule CCRF-CEM ha mostrato un numero modale di 47 cromosomi, che varia da 41 a 95. Le cellule CCRF-CEM non presentano perdite o guadagni consistenti. Non mostrano perdite o guadagni consistenti di cromosomi specifici né cromosomi marcatori. Tuttavia, il 28% delle cellule con 45 cromosomi mostrava una C, il 53% di tutte le cellule aveva una D in più e il 35% una F in più.

Le cellule CCRF-CEM sono tumorigeniche e possono causare tumori nei criceti siriani. Queste cellule esprimono geni e antigeni CD3, CD5, CD7 e CD4. Inoltre, l'analisi degli isoenzimi ha mostrato ADA, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1; PEP-D, 1; PGD, C; PGM1, 1; PGM3, 0. Secondo quanto riportato, queste cellule sono prive di particelle virali come determinato dalla microscopia elettronica.

Uno studio ha dimostrato che la combinazione di resveratrolo e prednisolone ha indotto l'apoptosi nelle cellule CCRF-CEM in modo dipendente dal tempo e dalla dose. Il trattamento combinato ha mostrato effetti sinergici sulla sovraespressione di BAx e sulla downregulation di BCL2.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Leucemia
Sinonimi
  • CCRF/CEM
  • CCRFCEM
  • CCRF.CEM
  • CCRF CEM
  • CCRF
  • CEM
  • CEM-CCRF
  • CEM-CCRF (CAMR)
  • CCRF/CEM/0
  • CEM/0
  • CEM-0
  • CCRF-CEM/S
  • GM03671
  • GM03671C

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Cellule polimorfe, nuclei grandi, formazione di microvilli
Tipo di cellula
Linfoblasto T
Tumorigenico
Sì, in topi nudi
Stato di ploidia
Aneuploide
Stato MSI
Instabile (MSI)
Tempo di raddoppio
24 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CCRF-CEM (numero di catalogo Cytion 300147)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0207

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
P53 negativo
Espressione dell'antigene
CD3 B (37%), CD4 (50%), CD5 (95%), CD7 (77%)
Isoenzimi
G6PD, B
Virus
EBV negativo
Trascriptasi inversa
Negativo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Subcoltura
Mantenere le colture aggiungendo o sostituendo periodicamente il terreno. Avviare le colture con una densità di 5 x 105 cellule/ml e mantenere la concentrazione cellulare compresa tra 3 x 105 e 1 x 106 cellule/ml per una crescita ottimale.
Densità di semina
Avviare nuove colture a 1 x 105 cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3 giorni
Recupero post-scongelamento
Lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento per almeno 48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
4 anni
Etnia
Caucasico