Pāriet uz saturu
CCRF-CEM šūnas
Audums
Perifērās asinis
Slimība
Leikēmija
Sinonīmi
CCRF/CEM, CCRFCEM, CCRF.CEM, CCRF CEM, CCRF, CEM, CEM-CCRF, CEM-CCRF (CAMR), CCRF/CEM/0, CEM/0, CEM-0, CCRF-CEM/S, GM03671, GM03671C

Dokumenti

CCRF-CEM šūnas

Cell line · Preces numurs 300147

CCRF-CEM šūnas ir cilvēka T-limfoblastu veids, ko plaši izmanto imūnonkoloģijas un imunoloģijas pētījumos. Šīs šūnas tika izdalītas no perifērajām ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CCRF-CEM šūnas ir cilvēka T limfoblastu veids, ko parasti izmanto imūnonkoloģiskajos un imunoloģiskajos pētījumos. Šīs šūnas tika izolētas no četrus gadus vecas kaukāzietes ar akūtu limfoblastisko leikēmiju (ALL) perifērajām asinīm.

CCRF-CEM aug suspensijā un var sasniegt lielu šūnu blīvumu, ja tās kultivē rotējošās kolbās. CCRF-CEM šūnu kariotipa analīze parādīja, ka vidējais hromosomu skaits ir 47 hromosomas, bet to skaits svārstās no 41 līdz 95 hromosomām. Tām nav novērojams konsekvents konkrētu hromosomu zudums vai pieaugums, kā arī nav marķieru hromosomu. Tomēr 28 % šūnu ar 45 hromosomām bija C- un 53 % no visām šūnām bija papildu D, bet 35 % - papildu F.

CCRF-CEM šūnas ir tumorogēnas un var izraisīt audzējus Sīrijas kāmjiem. Šīs šūnas ekspresē CD3, CD5, CD7 un CD4 gēnus un antigēnus. Turklāt izoenzīmu analīze parādīja, ka ADA, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1; PEP-D, 1; PGD, C; PGM1, 1; PGM3, 0. Tiek ziņots, ka šūnās nav vīrusa daļiņu, kā noteikts elektronmikroskopijā.

Pētījums liecina, ka resveratrola un prednizolona kombinācija izraisīja apoptozi CCRF-CEM šūnās laika un devas atkarīgā veidā. Kombinētā terapija uzrādīja sinerģisku iedarbību uz BAx hiperekspresiju un BCL2 lejupslīdi.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
Leikēmija
Sinonīmi
  • CCRF/CEM
  • CCRFCEM
  • CCRF.CEM
  • CCRF CEM
  • CCRF
  • CEM
  • CEM-CCRF
  • CEM-CCRF (CAMR)
  • CCRF/CEM/0
  • CEM/0
  • CEM-0
  • CCRF-CEM/S
  • GM03671
  • GM03671C

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Polimorfas šūnas, lieli kodoli, mikroviļu veidošanās
Šūnu tips
T limfoblasts
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm
Ploidijas statuss
Aneuploīds
MSI statuss
Nestabils (MSI)
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24 stundas

04Identifikatori

Atsauce
CCRF-CEM (Cytion kataloga numurs 300147)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0207

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
P53 negatīvs
Antigēna ekspresija
CD3 B (37%), CD4 (50%), CD5 (95%), CD7 (77%)
Izoenzīmi
G6PD, B
Vīrusi
EBV negatīvs
Reversā transkriptāze
Negatīvs

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Sēšanas blīvums
Sāciet jaunas kultūras ar 1 x 105 šūnām/ml
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Ļaujiet šūnām atgūties pēc sasaldēšanas procesa vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
4 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis