Mine otse sisu juurde
CCRF-CEM rakud
Kude
Perifeerne veri
Haigus
Leukeemia
Sünonüümid
CCRF/CEM, CCRFCEM, CCRF.CEM, CCRF CEM, CCRF, CEM, CEM-CCRF, CEM-CCRF (CAMR), CCRF/CEM/0, CEM/0, CEM-0, CCRF-CEM/S, GM03671, GM03671C

Dokumendid

CCRF-CEM rakud

Cell line · Toote number 300147

CCRF-CEM-rakud on inimese T-lümfoblastide tüüp, mida kasutatakse laialdaselt immunoonkoloogia ja immunoloogia uuringutes. Need rakud eraldati perifeersest ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CCRF-CEM rakud on inimese T-lümfoblastide tüüp, mida kasutatakse tavaliselt immunonkoloogilistes ja immunoloogilistes uuringutes. Need rakud isoleeriti 4-aastase, ägeda lümfoblastileukeemiaga (ALL) naissoost kaukaaslase perifeersest verest.

CCRF-CEM kasvavad suspensioonis ja võivad saavutada suure rakutiheduse, kui neid kasvatatakse spinnerkolbides. CCRF-CEM rakkude karyotüübi analüüs näitas, et nende kromosoomide modaalne arv on 47, mis ulatub 41-st kuni 95-ni. Nad ei näita konkreetsete kromosoomide järjekindlat kadu ega juurdekasvu ning puuduvad markerkromosoomid. Siiski oli 28% rakkudest 45 kromosoomiga C- ja 53% kõigist rakkudest D- ja 35% F-lisa.

CCRF-CEM rakud on tuumorigeensed ja võivad tekitada süüria hamstritel kasvajaid. Need rakud ekspresseerivad CD3, CD5, CD7 ja CD4 geene ja antigeene. Lisaks näitas isoensüümianalüüs ADA, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1; PEP-D, 1; PGD, C; PGM1, 1; PGM3, 0. Nende rakkude puhul on teatatud, et neis ei ole elektronmikroskoopia abil määratud viiruseosakesi.

Uuring näitas, et resveratrooli ja prednisolooni kombinatsioon indutseeris CCRF-CEM rakkudes apoptoosi ajast ja annusest sõltuvalt. Kombineeritud ravi avaldas sünergistlikku mõju BAx üleekspressioonile ja BCL2 allareguleerimisele.

Kude
Perifeerne veri
Haigus
Leukeemia
Sünonüümid
  • CCRF/CEM
  • CCRFCEM
  • CCRF.CEM
  • CCRF CEM
  • CCRF
  • CEM
  • CEM-CCRF
  • CEM-CCRF (CAMR)
  • CCRF/CEM/0
  • CEM/0
  • CEM-0
  • CCRF-CEM/S
  • GM03671
  • GM03671C

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Polümorfsed rakud, suured tuumad, mikrovillide moodustumine
Rakutüüp
T lümfoblast
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
Ploidsus
Aneuploidne
MSI staatus
Ebastabiilne (MSI)
Kahekordistumisaeg
24 tundi

04Tunnused

Viide
CCRF-CEM (Cytioni katalooginumber 300147)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0207

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 negatiivne
Antigeeni ekspressioon
CD3 B (37%), CD4 (50%), CD5 (95%), CD7 (77%)
Isoensüümid
G6PD, B
Viirused
EBV negatiivne
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Külvitihedus
Alustage uusi kultuure 1 x 105 rakku/ml
Vedeliku vahetus
Iga 3 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Laske rakkudel vähemalt 48 tundi külmutamisest taastuda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
4 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia