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CCRF-CEM-Zellen
Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Leukämie
Synonyme
CCRF/CEM, CCRFCEM, CCRF.CEM, CCRF CEM, CCRF, CEM, CEM-CCRF, CEM-CCRF (CAMR), CCRF/CEM/0, CEM/0, CEM-0, CCRF-CEM/S, GM03671, GM03671C

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CCRF-CEM-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300147

CCRF-CEM-Zellen sind eine Art menschlicher T-Lymphoblasten, die häufig in der immunonkologischen und immunologischen Forschung verwendet werden. Diese Zellen wurden aus dem peripheren … isoliert.

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

CCRF-CEM-Zellen sind eine Art menschlicher T-Lymphoblasten, die häufig in der immunonkologischen und immunologischen Forschung verwendet werden. Diese Zellen wurden aus dem peripheren Blut einer 4-jährigen Kaukasierin mit akuter lymphatischer Leukämie (ALL) isoliert.

CCRF-CEM wachsen in Suspension und erreichen eine hohe Zelldichte, wenn sie in Spinnerflaschen kultiviert werden. Die Karyotyp-Analyse der CCRF-CEM-Zellen ergab eine durchschnittliche Anzahl von 47 Chromosomen, die von 41 bis 95 reicht. Sie zeigen keinen konsistenten Verlust oder Zuwachs bestimmter Chromosomen und keine Markerchromosomen. Allerdings wiesen 28 % der Zellen mit 45 Chromosomen ein C und 53 % aller Zellen ein zusätzliches D auf, und 35 % hatten ein zusätzliches F.

CCRF-CEM-Zellen sind tumorerzeugend und können bei syrischen Hamstern Tumore verursachen. Diese Zellen exprimieren CD3-, CD5-, CD7- und CD4-Gene und -Antigene. Darüber hinaus ergab die Isoenzymanalyse ADA, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1; PEP-D, 1; PGD, C; PGM1, 1; PGM3, 0. Diese Zellen sind Berichten zufolge frei von Viruspartikeln, wie durch Elektronenmikroskopie festgestellt wurde.

Eine Studie hat gezeigt, dass die Kombination von Resveratrol und Prednisolon die Apoptose in CCRF-CEM-Zellen zeit- und dosisabhängig auslöst. Die Kombinationsbehandlung zeigte synergistische Effekte auf die Überexpression von BAx und die Herunterregulierung von BCL2.

Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Leukämie
Synonyme
  • CCRF/CEM
  • CCRFCEM
  • CCRF.CEM
  • CCRF CEM
  • CCRF
  • CEM
  • CEM-CCRF
  • CEM-CCRF (CAMR)
  • CCRF/CEM/0
  • CEM/0
  • CEM-0
  • CCRF-CEM/S
  • GM03671
  • GM03671C

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Polymorphe Zellen, große Zellkerne, Bildung von Mikrovilli
Zelltyp
T-Lymphoblast
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen
Ploidie-Status
Aneuploid
MSI-Status
Instabil (MSI)
Verdopplungszeit
24 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
CCRF-CEM (Cytion Katalognummer 300147)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0207

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
P53 negativ
Antigenexpression
CD3 B (37%), CD4 (50%), CD5 (95%), CD7 (77%)
Isoenzyme
G6PD, B
Viren
EBV negativ
Reverse Transkriptase
Negativ

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% hitzeinaktiviertem FBS
Subkultivierung
Halten Sie die Kulturen aufrecht, indem Sie regelmäßig Medium hinzufügen oder austauschen. Beginnen Sie die Kulturen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/ml und halten Sie die Zellkonzentration im Bereich von 3 x 105 bis 1 x 106 Zellen/ml, um ein optimales Wachstum zu erzielen.
Aussaatdichte
Beginnen Sie neue Kulturen mit 1 x 105 Zellen/ml.
Flüssigkeitswechsel
Alle 3 Tage
Erholung nach dem Auftauen
Lassen Sie die Zellen mindestens 48 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
4 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch