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Células CCRF-CEM
Pañuelo de papel
Sangre periférica
Enfermedad
Leucemia
Sinónimos
CCRF/CEM, CCRFCEM, CCRF.CEM, CCRF CEM, CCRF, CEM, CEM-CCRF, CEM-CCRF (CAMR), CCRF/CEM/0, CEM/0, CEM-0, CCRF-CEM/S, GM03671, GM03671C

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Células CCRF-CEM

Cell line · Número de producto 300147

Las células CCRF-CEM son un tipo de linfoblastos T humanos que se utilizan habitualmente en la investigación en inmuno-oncología e inmunología. Estas células se aislaron de la sangre periférica...

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01Información general

Descripción

Las células CCRF-CEM son un tipo de linfoblastos T humanos utilizados habitualmente en la investigación inmuno-oncológica e inmunológica. Estas células se aislaron de la sangre periférica de una niña caucásica de 4 años con leucemia linfoblástica aguda (LLA).

Las CCRF-CEM crecen en suspensión y pueden alcanzar una alta densidad celular cuando se cultivan en matraces giratorios. El análisis del cariotipo de las células CCRF-CEM mostró un número modal de 47 cromosomas, con un rango de 41 a 95. No muestran pérdida o ganancia consistente de cromosomas. No muestran ninguna pérdida o ganancia consistente de cromosomas específicos ni cromosomas marcadores. Sin embargo, el 28% de las células con 45 cromosomas mostraban una C- y el 53% de todas las células tenían una D adicional, y el 35% tenían una F adicional.

Las células CCRF-CEM son tumorigénicas y pueden causar tumores en hámsters sirios. Estas células expresan genes y antígenos CD3, CD5, CD7 y CD4. Además, el análisis de isoenzimas mostró ADA, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1; PEP-D, 1; PGD, C; PGM1, 1; PGM3, 0. Se ha informado de que estas células están libres de partículas de virus, según se ha determinado por microscopía electrónica.

Un estudio ha demostrado que la combinación de resveratrol y prednisolona indujo la apoptosis en células CCRF-CEM de forma dependiente del tiempo y de la dosis. El tratamiento combinado mostró efectos sinérgicos sobre la sobreexpresión de BAx y la regulación a la baja de BCL2.

Pañuelo de papel
Sangre periférica
Enfermedad
Leucemia
Sinónimos
  • CCRF/CEM
  • CCRFCEM
  • CCRF.CEM
  • CCRF CEM
  • CCRF
  • CEM
  • CEM-CCRF
  • CEM-CCRF (CAMR)
  • CCRF/CEM/0
  • CEM/0
  • CEM-0
  • CCRF-CEM/S
  • GM03671
  • GM03671C

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Células polimorfas, núcleos grandes, formación de microvellosidades
Tipo de célula
Linfoblasto T
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos
Estado de ploidía
Aneuploide
Estado de MSI
Inestable (MSI)
Tiempo de duplicación
24 horas

04Identificadores

Referencia
CCRF-CEM (número de catálogo de Cytion 300147)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0207

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
P53 negativo
Expresión de antígenos
CD3 B (37%), CD4 (50%), CD5 (95%), CD7 (77%)
Isoenzimas
G6PD, B
Virus
VEB negativo
Transcriptasa inversa
Negativo

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS inactivado por calor
Subcultivo
Mantenga los cultivos añadiendo o sustituyendo periódicamente el medio. Inicie los cultivos con una densidad de 5 x 105 células/ml y mantenga la concentración celular dentro del rango de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para un crecimiento óptimo.
Densidad de siembra
Inicie nuevas culturas a 1 x 105 células/ml.
Renovación de fluidos
Cada 3 días
Recuperación tras la descongelación
Deje que las células se recuperen del proceso de congelación durante al menos 48 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
4 años
Origen étnico
Caucásico