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HEK293-CD20
Tissu
Rein fœtal
Maladie
Transformé/immortalisé ; non tumorigène (lignée HEK293)

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HEK293-CD20

Cell line · Référence du produit 305987

Avertissement : les prix indiqués pour les lignées cellulaires s'adressent exclusivement aux clients du secteur universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, les prix...

€1,900.00hors taxes et frais de port
Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description

Avertissement : les prix indiqués pour les lignées cellulaires s'adressent exclusivement aux clients du secteur universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d'environ 6 250 €.
Si vous représentez une entité commerciale ou si vous ne savez pas à quelle catégorie vous appartenez, veuillez nous contacter.


Les cellules HEK293-CD20 sont des cellules rénales embryonnaires humaines 293 (HEK293) modifiées pour exprimer de manière stable le CD20 humain (MS4A1), une phosphoprotéine transmembranaire non glycosylée principalement exprimée sur les lymphocytes B. Le CD20 intervient dans la régulation de l'activation, de la prolifération et de la différenciation des lymphocytes B, ainsi que dans la signalisation calcique, et constitue l'une des cibles thérapeutiques les plus largement validées dans le domaine des hémopathies malignes et des maladies auto-immunes. Les modèles HEK293-CD20 stables permettent une expression de surface contrôlée et reproductible de l'antigène, ce qui facilite la caractérisation détaillée des thérapies ciblant le CD20 et des mécanismes à médiation immunitaire.

Les cellules HEK293-CD20 sont largement utilisées en immuno-oncologie et dans le développement de produits biologiques pour l'évaluation d'anticorps monoclonaux, d'anticorps bispécifiques, de conjugués anticorps-médicaments et de thérapies à base de cellules immunitaires modifiées ciblant le CD20. Ces cellules permettent l'analyse quantitative de l'affinité de liaison des anticorps, de la spécificité des épitopes, de l'occupation des récepteurs, de la dynamique d'internalisation et des fonctions effectrices immunitaires médiées par le Fc, telles que la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC) et la cytotoxicité dépendante du complément (CDC). Elles sont également couramment utilisées dans le développement de tests de cytométrie en flux, les tests de puissance, les bioessais à rapporteur et les workflows de criblage thérapeutique à haut débit. Comme les cellules HEK293 permettent une expression efficace des protéines recombinantes et une croissance cellulaire robuste, elles constituent une plateforme fiable et évolutive pour la création de tests standardisés et les études de validation de cibles.

Tissu
Rein fœtal
Maladie
Transformé/immortalisé ; non tumorigène (lignée HEK293)
Applications
Développement d'anticorps ciblant le CD20 et d'anticorps bispécifiques ; thérapie par cellules CAR-T ; tests ADCC/CDC ; cytométrie en flux ; essais de puissance des produits biologiques ; recherche sur les antigènes des lymphocytes B

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CD20 (MS4A1) expression construct for therapeutic antibody and immune effector function studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Cellules épithéliales
Temps de doublement
environ 24 à 36 heures

04Identifiants

Référence
HEK293-CD20 (référence Cytion 305987)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_A8V4

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
CD20

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 1 mM de pyruvate de sodium, 10 mM de HEPES, 1 % de NEAA. Ajouter de la généticine (G418-Sulfat) pour obtenir une concentration finale de 1 mg/ml.
Réactif de dissociation
Trypsine-EDTA
Repiquage
Pour la culture de routine de cellules adhérentes : Aspirer l'ancien milieu de culture des cellules adhérentes et les laver avec du PBS pour éliminer tout milieu restant. Après avoir aspiré le PBS, ajouter le volume approprié de solution de Trypsine/EDTA en fonction de la taille du récipient de culture (par exemple, 1 ml pour un flacon T25, 3 ml pour un flacon T75) et incuber à température ambiante ou à 37°C jusqu'à ce que les cellules se détachent (5-10 minutes). Surveiller le détachement au microscope et tapoter doucement le récipient si nécessaire pour libérer les cellules. Une fois les cellules détachées, ajouter du milieu complet pour inactiver la trypsine/EDTA, remettre doucement les cellules en suspension et transférer une aliquote de la suspension cellulaire dans un nouveau récipient de culture contenant du milieu frais. Placer le récipient dans un incubateur réglé à 37°C avec 5% deCO2, et changer le milieu tous les 2-3 jours.
Rapport de fractionnement
1 à 5
Densité de semis
2 à 4 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel

Après décongélation, diviser les cellules dans un rapport de 1:2 à 1:3 dans des flacons T25 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer (pour les cultures adhérentes) pendant au moins 24 heures.

Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Fœtus