Gå direkt till innehållet
HEK293-CD20
Vävnad
Fetal njure
Sjukdom
Transformerad/odödliggjord; icke-tumörbildande (HEK293-bakgrund)

HEK293-CD20

Cell line · Produktnummer 305987

Ansvarsfriskrivning: De priser som anges för cellinjer gäller uteslutande för akademiska kunder och kunder inom ideella organisationer. För kommersiella aktörer gäller pr...

€1,900.00exkl. moms och frakt
Tillverkas på beställning
1

01Allmän information

Beskrivning

Ansvarsfriskrivning: De priser som anges för cellinjer gäller endast för akademiska kunder och ideella organisationer. För kommersiella aktörer är priset cirka 6 250 euro.
Om du representerar en kommersiell aktör eller är osäker på vilken kategori som gäller, vänligen kontakta oss.


HEK293-CD20-celler är humana embryonala njurceller 293 (HEK293) som har modifierats för att stabilt uttrycka humant CD20 (MS4A1), ett icke-glykosylerat transmembrant fosfoprotein som främst uttrycks på B-lymfocyter. CD20 är involverat i regleringen av B-cellers aktivering, proliferation, differentiering och kalciumsignalering, och fungerar som ett av de mest omfattande validerade terapeutiska målen vid hematologiska maligniteter och autoimmuna sjukdomar. Stabila HEK293-CD20-modeller ger kontrollerad och reproducerbar ytuttryck av antigenet, vilket möjliggör detaljerad karakterisering av CD20-riktade terapier och immunmedierade mekanismer.

HEK293-CD20-celler används i stor utsträckning inom immuno-onkologi och utveckling av biologiska läkemedel för utvärdering av monoklonala antikroppar, bispecifika antikroppar, antikropps-läkemedelskonjugat och konstruerade immunceller som riktar sig mot CD20. Dessa celler möjliggör kvantitativ analys av antikroppars bindningsaffinitet, epitopspecificitet, receptorbeläggning, internaliseringsdynamik samt Fc-medierade immunförsvarfunktioner såsom antikroppsberoende cellulär cytotoxicitet (ADCC) och komplementberoende cytotoxicitet (CDC). De används också ofta vid utveckling av flödescytometriska analyser, potensbestämning, reporterbioassays och arbetsflöden för terapeutisk screening med hög genomströmning. Eftersom HEK293-celler möjliggör effektivt uttryck av rekombinanta proteiner och robust celltillväxt, utgör de en tillförlitlig och skalbar plattform för standardiserad analysgenerering och studier för validering av målmolekyler.

Vävnad
Fetal njure
Sjukdom
Transformerad/odödliggjord; icke-tumörbildande (HEK293-bakgrund)
Ansökningar
Utveckling av CD20-riktade antikroppar och bispecifika antikroppar; CAR-T-cellterapi; ADCC-/CDC-analyser; flödescytometri; potensbestämning av biologiska läkemedel; forskning om B-cellsantigener

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CD20 (MS4A1) expression construct for therapeutic antibody and immune effector function studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Epiteliala celler
Fördubblingstid
ca 24–36 timmar

04Identifierare

Källa
HEK293-CD20 (Cytion-artikelnummer 305987)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_A8V4

05Uttryck och mottaglighet

Receptorer som uttrycks
CD20

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera med 10% FBS, 1 mM natriumpyruvat, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Tillsätt Geneticin (G418-Sulfat) för att uppnå en slutlig koncentration på 1 mg/ml.
Dissociationsmedel
Trypsin-EDTA
Vidareodling
För rutinmässig adherent cellkultur: Aspirera det gamla odlingsmediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS för att avlägsna eventuellt kvarvarande medium. Efter aspirering av PBS, tillsätt lämplig volym Trypsin/EDTA-lösning baserat på odlingskärlets storlek (t.ex. 1 ml för en T25-kolv, 3 ml för en T75-kolv) och inkubera vid rumstemperatur eller 37°C tills cellerna lossnar (5-10 minuter). Övervaka avskiljningen under mikroskop och knacka försiktigt på kärlet om det behövs för att frigöra cellerna. När cellerna har lossnat, tillsätt komplett medium för att inaktivera trypsin/EDTA, resuspendera cellerna försiktigt och överför en alikvot av cellsuspensionen till ett nytt odlingskärl med färskt medium. Placera kärlet i en inkubator inställd på 37°C med 5%CO2 och byt medium var 2-3:e dag.
Uppdelningsförhållande
1 till 5
Såtäthet
2 till 4 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining

Efter upptining, dela upp cellerna i förhållandet 1:2 till 1:3 i T25-kolvar och låt cellerna återhämta sig från frysningsprocessen och fästa (för vidhäftande kulturer) i minst 24 timmar.

Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Foster