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HEK293-CD20
Tissue
Rein fœtal
Disease
Transformé/immortalisé; non tumorigène (lignée HEK293)

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HEK293-CD20

Cell line · Product number 305987

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

Avertissement : Les prix indiqués pour les lignées cellulaires s’adressent exclusivement aux clients du milieu universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d’environ 6 250 €.
Si vous représentez une entité commerciale ou si vous ne savez pas à quelle catégorie vous appartenez, veuillez nous contacter.


Les cellules HEK293-CD20 sont des cellules rénales embryonnaires humaines 293 (HEK293) modifiées génétiquement pour exprimer de manière stable le CD20 humain (MS4A1), une phosphoprotéine transmembranaire non glycosylée principalement exprimée sur les lymphocytes B. Le CD20 intervient dans la régulation de l’activation, de la prolifération et de la différenciation des cellules B, ainsi que dans la signalisation calcique; il constitue l’une des cibles thérapeutiques les plus largement validées dans le traitement des hémopathies malignes et des maladies auto-immunes. Les modèles HEK293-CD20 stables permettent une expression de surface contrôlée et reproductible de l’antigène, ce qui facilite la caractérisation détaillée des traitements ciblant le CD20 et des mécanismes à médiation immunitaire.

Les cellules HEK293-CD20 sont largement utilisées en immuno-oncologie et dans le développement de produits biologiques pour l’évaluation d’anticorps monoclonaux, d’anticorps bispécifiques, de conjugués anticorps-médicaments et de thérapies à base de cellules immunitaires modifiées ciblant le CD20. Ces cellules permettent l’analyse quantitative de l’affinité de liaison des anticorps, de la spécificité des épitopes, de l’occupation des récepteurs, de la dynamique d’internalisation et des fonctions effectrices immunitaires médiées par la région Fc, telles que la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC) et la cytotoxicité dépendante du complément (CDC). Elles sont également couramment utilisées dans le développement de tests de cytométrie en flux, les essais de puissance, les bioessais à rapporteur et les flux de travail de criblage thérapeutique à haut débit. Comme les cellules HEK293 permettent une expression efficace des protéines recombinantes et une croissance cellulaire robuste, elles constituent une plateforme fiable et évolutive pour la création de tests standardisés et les études de validation de cibles.

Tissue
Rein fœtal
Disease
Transformé/immortalisé; non tumorigène (lignée HEK293)
Applications
Développement d’anticorps ciblant le CD20 et d’anticorps bispécifiques; thérapie par cellules CAR-T; tests ADCC/CDC; cytométrie en flux; essais d’efficacité des produits biologiques; recherche sur les antigènes des cellules B

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CD20 (MS4A1) expression construct for therapeutic antibody and immune effector function studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Cell type
Cellules épithéliales
Doubling time
environ 24 à 36 heures

04Identifiers

Citation
HEK293-CD20 (numéro de catalogue Cytion 305987)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_A8V4

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
CD20

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 1 mM de pyruvate de sodium, 10 mM d’HEPES et 1 % de NEAA. Ajouter de la Geneticin (G418-Sulfat) pour obtenir une concentration finale de 1 mg/mL.
Dissociation reagent
Trypsine-EDTA
Subculturing
Pour une culture cellulaire adhérente de routine : Aspirer l’ancien milieu de culture des cellules adhérentes, puis les laver avec du PBS afin d’éliminer tout résidu de milieu. Après avoir aspiré le PBS, ajouter le volume approprié de solution de trypsine/EDTA en fonction de la taille du récipient de culture (p. ex., 1 ml pour un flacon T25, 3 ml pour un flacon T75), puis incubez à température ambiante ou à 37 °C jusqu’à ce que les cellules se détachent (5 à 10 minutes). Surveillez le détachement au microscope et tapotez doucement le récipient si nécessaire pour libérer les cellules. Une fois les cellules détachées, ajoutez du milieu complet pour inactiver la trypsine/EDTA, remettez délicatement les cellules en suspension, puis transférez une aliquote de la suspension cellulaire dans un nouveau récipient de culture contenant du milieu frais. Placer le récipient dans un incubateur réglé à 37 °C avec 5 % de CO₂, et changer le milieu tous les 2 à 3 jours.
Split ratio
1 à 5
Seeding density
de 2 à 4 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery

Après la décongélation, divisez les cellules dans un rapport de 1:2 à 1:3 dans des flacons T25 et laissez-les se remettre du processus de congélation et adhérer (pour les cultures adhérentes) pendant au moins 24 heures.

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
Fœtus