الانتقال إلى المحتوى
HEK293-CD20
الأنسجة
كلية الجنين
المرض
تم تحويله/تخليده؛ غير مسبب للأورام (خلفية HEK293)

المستندات

HEK293-CD20

Cell line · رقم المنتج 305987

إخلاء المسؤولية: الأسعار المعروضة للخطوط الخلوية مخصصة حصريًّا للعملاء الأكاديميين أو غير الهادفين للربح. أما بالنسبة للكيانات التجارية، فإن الأسعار...

€1,900.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
حسب الطلب
1

01معلومات عامة

الوصف

إخلاء المسؤولية: الأسعار المعروضة لخطوط الخلايا مخصصة حصريًّا للعملاء الأكاديميين أو غير الربحيين. أما بالنسبة للكيانات التجارية، فيبلغ السعر حوالي 6,250 يورو.
إذا كنت تمثل كيانًا تجاريًّا أو لم تكن متأكدًا من الفئة التي تنطبق عليك، يرجى الاتصال بنا.


خلايا HEK293-CD20 هي خلايا الكلى الجنينية البشرية 293 (HEK293) التي تم هندستها للتعبير بشكل مستقر عن CD20 البشري (MS4A1)، وهو بروتين فوسفوري عبر الغشاء غير جليكوزيلاتي يتم التعبير عنه بشكل أساسي على الخلايا الليمفاوية B. يشارك CD20 في تنظيم تنشيط الخلايا البائية وتكاثرها وتمايزها وإشارات الكالسيوم، ويُعد أحد الأهداف العلاجية الأكثر تحققًا على نطاق واسع في الأورام الخبيثة الدموية وأمراض المناعة الذاتية. توفر نماذج HEK293-CD20 المستقرة تعبيرًا سطحيًا خاضعًا للرقابة وقابلًا للتكرار للمستضد، مما يتيح التوصيف التفصيلي للعلاجات التي تستهدف CD20 والآليات التي تتوسطها المناعة.

تُستخدم خلايا HEK293-CD20 على نطاق واسع في علم الأورام المناعي وتطوير المستحضرات البيولوجية لتقييم الأجسام المضادة أحادية النسيلة، والأجسام المضادة ثنائية النوع، ومركبات الأجسام المضادة والأدوية، والعلاجات بالخلايا المناعية المعدلة وراثيًا التي تستهدف CD20. تدعم هذه الخلايا التحليل الكمي لتقارب ارتباط الأجسام المضادة، وخصوصية المستضد، وشغل المستقبلات، وديناميكيات الاستيعاب، ووظائف المؤثرات المناعية التي يتوسطها Fc مثل السمية الخلوية المعتمدة على الأجسام المضادة (ADCC) والسمية الخلوية المعتمدة على المكمل (CDC). كما أنها تُستخدم بشكل شائع في تطوير اختبارات قياس التدفق الخلوي، واختبارات الفعالية، والاختبارات الحيوية المُبلِغة، وسير عمل الفحص العلاجي عالي الإنتاجية. ونظرًا لأن خلايا HEK293 تدعم التعبير الفعال للبروتينات المُعاد تجميعها ونمو الخلايا القوي، فإنها توفر منصة موثوقة وقابلة للتوسع لتوليد الاختبارات المعيارية ودراسات التحقق من صحة الأهداف.

الأنسجة
كلية الجنين
المرض
تم تحويله/تخليده؛ غير مسبب للأورام (خلفية HEK293)
التطبيقات
تطوير الأجسام المضادة الموجهة لـ CD20 والأجسام المضادة ثنائية النوع؛ العلاج بالخلايا التائية المعدلة جينياً (CAR-T)؛ اختبارات ADCC/CDC؛ قياس التدفق الخلوي؛ اختبار فعالية المستحضرات البيولوجية؛ أبحاث مستضدات الخلايا البائية

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CD20 (MS4A1) expression construct for therapeutic antibody and immune effector function studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الخلايا الظهارية
زمن المضاعفة
حوالي 24-36 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HEK293-CD20 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305987)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_A8V4

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
اليوم الثاني

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ FBS، و1 ملي مولار من بيروفات الصوديوم، و10 ملي مولار من HEPES، و1٪ NEAA. يُضاف الجينيتجين (G418-Sulfat) لتحقيق تركيز نهائي قدره 1 مجم/ملل.
كاشف التفكك
التربسين-إدتا
إعادة الاستنبات
لمزرعة الخلايا الملتصقة الروتينية: اشفط وسط المزرعة القديم من الخلايا الملتصقة، واغسلها بمحلول PBS لإزالة أي وسط متبقي. بعد شفط PBS، أضف الكمية المناسبة من محلول التربسين/إيدتا بناءً على حجم وعاء المزرعة (على سبيل المثال، 1 مل لقارورة T25، و3 مل لقارورة T75) واحتضانها في درجة حرارة الغرفة أو 37 درجة مئوية حتى تنفصل الخلايا (5-10 دقائق). راقب الانفصال تحت المجهر، واضغط برفق على الوعاء إذا لزم الأمر لتحرير الخلايا. بمجرد الانفصال، أضف وسطًا كاملاً لتعطيل التريبسين/إيدتا، وأعد ترسيب الخلايا برفق وانقل كمية قليلة من معلق الخلايا إلى وعاء مستنبت جديد يحتوي على وسط جديد. ضع الوعاء في حاضنة مضبوطة على 37 درجة مئوية مع 5% من ثاني أكسيد الكربون، وقم بتغيير الوسط كل 2-3 أيام.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 5
كثافة البذر
2 إلى 4 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد

بعد الذوبان، قم بتقسيم الخلايا بنسبة 1:2 إلى 1:3 في قوارير T25 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق (للمزارع الملتصقة) لمدة 24 ساعة على الأقل.

إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
الجنين

قد تحتاج أيضًا إلى