HEK293-CD20

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Las células HEK293-CD20 son células renales embrionarias humanas 293 (HEK293) modificadas genéticamente para expresar de forma estable el CD20 humano (MS4A1), una fosfoproteína transmembrana no glicosilada que se expresa principalmente en los linfocitos B. El CD20 interviene en la regulación de la activación, proliferación y diferenciación de las células B, así como en la señalización del calcio, y constituye uno de los dianas terapéuticas más ampliamente validadas en neoplasias hematológicas y enfermedades autoinmunes. Los modelos estables de HEK293-CD20 proporcionan una expresión superficial controlada y reproducible del antígeno, lo que permite la caracterización detallada de terapias dirigidas al CD20 y de los mecanismos inmunomediados.

Las células HEK293-CD20 se utilizan ampliamente en inmuno-oncología y en el desarrollo de productos biológicos para la evaluación de anticuerpos monoclonales, anticuerpos biespecíficos, conjugados de anticuerpos y fármacos, y terapias con células inmunitarias modificadas dirigidas contra el CD20. Estas células permiten el análisis cuantitativo de la afinidad de unión de los anticuerpos, la especificidad de los epítopos, la ocupación de los receptores, la dinámica de internalización y las funciones efectoras inmunitarias mediadas por Fc, como la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) y la citotoxicidad dependiente del complemento (CDC). También se aplican habitualmente en el desarrollo de ensayos de citometría de flujo, pruebas de potencia, bioensayos con marcadores y flujos de trabajo de cribado terapéutico de alto rendimiento. Dado que las células HEK293 permiten una expresión eficiente de proteínas recombinantes y un crecimiento celular robusto, proporcionan una plataforma fiable y escalable para la generación de ensayos estandarizados y estudios de validación de dianas.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

Tras la descongelación, dividir las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en matraces T25 y dejar que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran (para cultivos adherentes) durante al menos 24 horas.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía