Премини към съдържанието
HEK293-CD20
Тъкан
Фетален бъбрек
Заболяване
Трансформиран/увековечен; нетуморогенен (на базата на HEK293)

Документи

HEK293-CD20

Cell line · Номер на продукта 305987

Забележка: Показаните цени за клетъчните линии са предназначени изключително за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цените...

€1,900.00без ДДС и доставка
Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание

Забележка: Посочените цени за клетъчните линии са валидни единствено за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цената е приблизително 6 250 евро.
Ако представлявате търговски субект или не сте сигурни в коя категория попадате, моля свържете се с нас.


Клетките HEK293-CD20 са човешки ембрионални бъбречни клетки 293 (HEK293), модифицирани да експресират стабилно човешки CD20 (MS4A1) – негликозилиран трансмембранен фосфопротеин, експресиран предимно върху В-лимфоцитите. CD20 участва в регулацията на активацията, пролиферацията, диференциацията и калциевата сигнализация на В-клетките и служи като една от най-широко валидираните терапевтични мишени при хематологични злокачествени заболявания и автоимунни заболявания. Стабилните модели HEK293-CD20 осигуряват контролирана и възпроизводима повърхностна експресия на антигена, което позволява подробна характеристика на терапевтичните средства, насочени към CD20, и на имуномедиираните механизми.

Клетките HEK293-CD20 се използват широко в имуноонкологията и разработването на биологични продукти за оценка на моноклонални антитела, биспецифични антитела, конюгати на антитела и лекарства и инженерни имунни клетъчни терапии, насочени към CD20. Тези клетки подпомагат количествения анализ на афинитета на свързване на антителата, специфичността на епитопа, заетостта на рецепторите, динамиката на интернализацията и Fc-медиираните имунни ефекторни функции, като антителозависима клетъчна цитотоксичност (ADCC) и комплемент-зависима цитотоксичност (CDC). Те се използват често и при разработването на тестове за проточна цитометрия, тестове за потентност, биоанализи с репортери и работни процеси за терапевтичен скрининг с висока производителност. Тъй като HEK293 клетките подпомагат ефективната експресия на рекомбинантни протеини и стабилния клетъчен растеж, те осигуряват надеждна и мащабируема платформа за създаване на стандартизирани тестове и проучвания за валидиране на мишени.

Тъкан
Фетален бъбрек
Заболяване
Трансформиран/увековечен; нетуморогенен (на базата на HEK293)
Приложения
Разработване на антитела, насочени срещу CD20, и биспецифични антитела; CAR-T-клетъчна терапия; ADCC/CDC-тестове; проточна цитометрия; тестване на ефикасността на биологични продукти; изследвания на антигени на В-клетките

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CD20 (MS4A1) expression construct for therapeutic antibody and immune effector function studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки
Време за удвояване
около 24–36 часа

04Идентификатори

Източник
HEK293-CD20 (каталожен номер на Cytion 305987)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_A8V4

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
CD20

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, 1 mM натриев пируват, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Добавете Geneticin (G418-Sulfat), за да достигнете крайна концентрация от 1 mg/ml.
Реагент за дисоциация
Трипсин-EDTA
Пресаждане
За рутинни адхезивни клетъчни култури: Аспирирайте старата хранителна среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, за да отстраните останалата среда. След като аспирирате PBS, добавете подходящия обем разтвор на трипсин/EDTA в зависимост от размера на съда за култивиране (напр. 1 ml за колба Т25, 3 ml за колба Т75) и инкубирайте при стайна температура или 37 °C, докато клетките се отделят (5-10 минути). Наблюдавайте отделянето под микроскоп и при необходимост леко потупайте съда, за да освободите клетките. След като се отделят, добавете пълна среда, за да инактивирате трипсина/EDTA, внимателно ресуспендирайте клетките и прехвърлете аликвотна част от клетъчната суспензия в нов съд за култивиране, съдържащ прясна среда. Поставете съда в инкубатор, настроен на 37 °C с 5 %CO2, и сменяйте средата на всеки 2-3 дни.
Коефициент на разделяне
от 1 до 5
Плътност на засяването
2 до 4 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване

След размразяването разделете клетките в съотношение 1:2 до 1:3 в колби Т25 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да залепнат (за залепнали култури) за най-малко 24 часа.

Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Плод

Може да ви е необходимо също