Skip to content
HEK293-CD20
Tissue
כליה עוברית
Disease
עבר שינוי/הונצח; אינו גורם לגידולים (על רקע HEK293)

Documents

HEK293-CD20

Cell line · Product number 305987

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

הצהרת הבהרה: המחירים המוצגים עבור קווי תאים מיועדים אך ורק ללקוחות אקדמיים או ללא כוונת רווח. עבור גופים מסחריים, המחיר הוא כ-6,250 אירו.
אם אתה מייצג גוף מסחרי או שאינך בטוח לאיזו קטגוריה אתה משתייך, אנא פנה אלינו.


תאי HEK293-CD20 הם תאי כליה עובריים אנושיים 293 (HEK293) שהונדסו כדי לבטא באופן יציב את CD20 האנושי (MS4A1), פוספופרוטאין טרנסממברני לא גליקוזילט המובע בעיקר על לימפוציטים מסוג B. CD20 מעורב בוויסות הפעלה, התרבות, התמיינות ותקשורת סידן של תאי B, ומשמש כאחד היעדים הטיפוליים המאושרים ביותר במחלות המטולוגיות ממאירות ובמחלות אוטואימוניות. מודלים יציבים של HEK293-CD20 מספקים ביטוי שטחי מבוקר וניתן לשחזור של האנטיגן, ומאפשרים אפיון מפורט של טיפולים המכוונים ל-CD20 ומנגנונים חיסוניים.

תאי HEK293-CD20 נמצאים בשימוש נרחב באימונו-אונקולוגיה ובפיתוח ביולוגיים להערכת נוגדנים מונוקלונליים, נוגדנים דו-ספציפיים, קונג'וגטים של נוגדנים ותרופות, וטיפולים בתאי חיסון מהונדסים המכוונים ל-CD20. תאים אלה תומכים בניתוח כמותי של זיקה לקשירת נוגדנים, ספציפיות לאפיטופ, תפוסת קולטנים, דינמיקת פנימיזציה ותפקודי אפקטורים חיסוניים בתיווך Fc, כגון ציטוטוקסיות תאית תלוית נוגדנים (ADCC) וציטוטוקסיות תלוית משלים (CDC). הם משמשים גם באופן נרחב בפיתוח בדיקות ציטומטריית זרימה, בדיקות עוצמה, ביו-אנליזות מדווחות ותהליכי סינון טיפוליים בעלי תפוקה גבוהה. מכיוון שתאי HEK293 תומכים בביטוי יעיל של חלבונים רקומביננטיים ובצמיחה תאית איתנה, הם מספקים פלטפורמה אמינה וניתנת להרחבה ליצירת בדיקות סטנדרטיות ולמחקרי אימות מטרות.

Tissue
כליה עוברית
Disease
עבר שינוי/הונצח; אינו גורם לגידולים (על רקע HEK293)
Applications
פיתוח נוגדנים המכוונים ל-CD20 ונוגדנים דו-ספציפיים; טיפול בתאי CAR-T; בדיקות ADCC/CDC; ציטומטריית זרימה; בדיקות יעילות של תרופות ביולוגיות; מחקר על אנטיגנים של תאי B

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CD20 (MS4A1) expression construct for therapeutic antibody and immune effector function studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל
Doubling time
כ-24–36 שעות

04Identifiers

Citation
HEK293-CD20 (מספר קטלוגי של Cytion: 305987)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_A8V4

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
CD20

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS, 1 mM נתרן פירובט, 10 mM HEPES, 1% NEAA. הוסף Geneticin (G418-Sulfat) עד לריכוז סופי של 1 מ"ג/מ"ל.
Dissociation reagent
טריפסין-EDTA
Subculturing
לגידול תאים נצמדים שגרתי: שאבו את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ושטפו אותם ב-PBS כדי להסיר את כל שאריות המדיום. לאחר שאיבת ה-PBS, הוסף את הנפח המתאים של תמיסת טריפסין/EDTA בהתאם לגודל כלי התרבית (לדוגמה, 1 מ"ל עבור בקבוק T25, 3 מ"ל עבור בקבוק T75) והדגר בטמפרטורת החדר או ב-37°C עד שהתאים יתנתקו (5-10 דקות). עקבו אחר ההתנתקות תחת מיקרוסקופ, ובמידת הצורך טפחו קלות על הכלי כדי לשחרר את התאים. לאחר ההתנתקות, הוסיפו מדיום שלם כדי להשבית את הטריפסין/EDTA, ערבבו קלות את התאים והעבירו חלק מהתמיסה לתוך כלי תרבית חדש המכיל מדיום טרי. הכניסו את הכלי לאינקובטור המכוון ל-37°C עם 5%CO2, והחליפו את המדיום כל 2-3 ימים.
Split ratio
1 עד 5
Seeding density
2 עד 4 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery

לאחר ההפשרה, חלק את התאים ביחס של 1:2 עד 1:3 בצלוחיות T25 והמתן לפחות 24 שעות עד שהתאים יתאוששו מתהליך ההקפאה וידבקו (בתרבויות דבקות).

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
עובר