Pereiti prie turinio
HEK293-CD20
Audinys
Vaisiaus inkstai
Liga
Transformuotas/imortalizuotas; nesukelia navikų (HEK293 fonas)

Dokumentai

HEK293-CD20

Cell line · Prekės numeris 305987

Atsakomybės apribojimas: Nurodytos ląstelių linijų kainos taikomos tik akademiniams ir pelno nesiekiančioms organizacijoms. Komerciniams subjektams kainos...

€1,900.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Pagaminta pagal užsakymą
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Atsakomybės apribojimas: Nurodytos ląstelių linijų kainos taikomos tik akademiniams ir nekomerciniams klientams. Komercinėms įmonėms kaina yra apie 6 250 eurų.
Jei atstovaujate komercinei įmonei arba nesate tikri, kuri kategorija jums taikoma, prašome susisiekti su mumis.


HEK293-CD20 ląstelės yra žmogaus embrioninės inkstų 293 (HEK293) ląstelės, modifikuotos taip, kad stabiliai ekspresuotų žmogaus CD20 (MS4A1) – neglikozilintą transmembraninį fosfoproteiną, kuris daugiausia ekspresuojamas B limfocituose. CD20 dalyvauja reguliuojant B ląstelių aktyvaciją, proliferaciją, diferenciaciją ir kalcio signalizaciją bei yra vienas iš plačiausiai patvirtintų terapinių tikslų hematologinių piktybinių navikų ir autoimuninių ligų gydymui. Stabilūs HEK293-CD20 modeliai užtikrina kontroliuojamą ir atkartojamą antigeno ekspresiją ląstelių paviršiuje, leidžiant išsamiai charakterizuoti CD20 taikiniais laikomus vaistus ir imuninės sistemos tarpininkaujamus mechanizmus.

HEK293-CD20 ląstelės plačiai naudojamos imunoonkologijoje ir biologinių preparatų kūrime monokloninių antikūnų, bispecifinių antikūnų, antikūnų ir vaistų konjugatų bei inžinerinių imuninių ląstelių terapijų, nukreiptų prieš CD20, vertinimui. Šios ląstelės leidžia atlikti kiekybinę antikūnų prisijungimo afiniteto, epitopo specifiškumo, receptorių užimtumo, internalizacijos dinamikos ir Fc tarpininkaujamų imuninių efektorių funkcijų, pvz., antikūnų priklausomo ląstelių citotoksiškumo (ADCC) ir komplemento priklausomo citotoksiškumo (CDC), analizę. Jos taip pat dažnai naudojamos srauto citometrijos tyrimų kūrimui, stiprumo tyrimams, reporterinių biologinių tyrimų ir didelio našumo terapinių atrankos procesų vykdymui. Kadangi HEK293 ląstelės palaiko veiksmingą rekombinantinių baltymų ekspresiją ir tvirtą ląstelių augimą, jos suteikia patikimą ir pritaikomą platformą standartizuotų tyrimų kūrimui ir tikslų patvirtinimo tyrimams.

Audinys
Vaisiaus inkstai
Liga
Transformuotas/imortalizuotas; nesukelia navikų (HEK293 fonas)
Paraiškos
CD20 antikūnų ir bispecifinių antikūnų kūrimas; CAR-T ląstelių terapija; ADCC/CDC tyrimai; srauto citometrija; biologinių preparatų stiprumo tyrimai; B ląstelių antigenų tyrimai

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CD20 (MS4A1) expression construct for therapeutic antibody and immune effector function studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Epitelio ląstelės
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug 24–36 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
HEK293-CD20 (Cytion katalogo numeris 305987)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_A8V4

05Išraiška ir jautrumas

Išreikšti receptoriai
CD20

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS, 1 mM natrio piruvatu, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Pridėkite geneticino (G418-Sulfat), kad galutinė koncentracija būtų 1 mg/ml.
Disociacijos reagentas
Trypsino ir EDTA
Subkultūrinis auginimas
Įprastinėms adherentinėms ląstelių kultūroms: Kad pašalintumėte visą likusią terpę, iš adherentinių ląstelių išsiurbkite seną terpę ir nuplaukite jas PBS. Išsiurbę PBS, įpilkite reikiamą kiekį tripsino ir EDTA tirpalo, atsižvelgiant į kultūros indo dydį (pvz., 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai), ir inkubuokite kambario arba 37 °C temperatūroje, kol ląstelės atsiskirs (5-10 min.). Stebėkite atsiskyrimą per mikroskopą ir, jei reikia, švelniai palieskite indą, kad ląstelės išsilaisvintų. Kai ląstelės atsiskiria, įpilkite pilną terpę, kad būtų inaktyvuotas tripsinas/EDTA, atsargiai reuspenduokite ląsteles ir perkelkite alikvotą ląstelių suspensijos į naują auginimo indą su šviežia terpe. Įstatykite indą į inkubatorių, kuriame nustatyta 37 °C temperatūra ir 5 %CO2, o terpę keiskite kas 2-3 dienas.
Skaidymo santykis
1–5
Sėjos tankis
2–4 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo

Po atšildymo suskirstykite ląsteles santykiu 1:2-1:3 į T25 kolbas ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso bei sukibti (jei tai adherencinės kultūros) mažiausiai 24 valandas.

Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Vaisius

Be to, jums gali prireikti