
- Audinys
- Vaisiaus inkstai
- Liga
- Transformuotas/imortalizuotas; nesukelia navikų (HEK293 fonas)
Dokumentai
HEK293-CD20
Cell line · Prekės numeris 305987
Atsakomybės apribojimas: Nurodytos ląstelių linijų kainos taikomos tik akademiniams ir pelno nesiekiančioms organizacijoms. Komerciniams subjektams kainos...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- HEK293-CD20Cell line€1,900.00
01Bendra informacija
- Aprašymas
Atsakomybės apribojimas: Nurodytos ląstelių linijų kainos taikomos tik akademiniams ir nekomerciniams klientams. Komercinėms įmonėms kaina yra apie 6 250 eurų.
Jei atstovaujate komercinei įmonei arba nesate tikri, kuri kategorija jums taikoma, prašome susisiekti su mumis.
HEK293-CD20 ląstelės yra žmogaus embrioninės inkstų 293 (HEK293) ląstelės, modifikuotos taip, kad stabiliai ekspresuotų žmogaus CD20 (MS4A1) – neglikozilintą transmembraninį fosfoproteiną, kuris daugiausia ekspresuojamas B limfocituose. CD20 dalyvauja reguliuojant B ląstelių aktyvaciją, proliferaciją, diferenciaciją ir kalcio signalizaciją bei yra vienas iš plačiausiai patvirtintų terapinių tikslų hematologinių piktybinių navikų ir autoimuninių ligų gydymui. Stabilūs HEK293-CD20 modeliai užtikrina kontroliuojamą ir atkartojamą antigeno ekspresiją ląstelių paviršiuje, leidžiant išsamiai charakterizuoti CD20 taikiniais laikomus vaistus ir imuninės sistemos tarpininkaujamus mechanizmus.
HEK293-CD20 ląstelės plačiai naudojamos imunoonkologijoje ir biologinių preparatų kūrime monokloninių antikūnų, bispecifinių antikūnų, antikūnų ir vaistų konjugatų bei inžinerinių imuninių ląstelių terapijų, nukreiptų prieš CD20, vertinimui. Šios ląstelės leidžia atlikti kiekybinę antikūnų prisijungimo afiniteto, epitopo specifiškumo, receptorių užimtumo, internalizacijos dinamikos ir Fc tarpininkaujamų imuninių efektorių funkcijų, pvz., antikūnų priklausomo ląstelių citotoksiškumo (ADCC) ir komplemento priklausomo citotoksiškumo (CDC), analizę. Jos taip pat dažnai naudojamos srauto citometrijos tyrimų kūrimui, stiprumo tyrimams, reporterinių biologinių tyrimų ir didelio našumo terapinių atrankos procesų vykdymui. Kadangi HEK293 ląstelės palaiko veiksmingą rekombinantinių baltymų ekspresiją ir tvirtą ląstelių augimą, jos suteikia patikimą ir pritaikomą platformą standartizuotų tyrimų kūrimui ir tikslų patvirtinimo tyrimams.
- Audinys
- Vaisiaus inkstai
- Liga
- Transformuotas/imortalizuotas; nesukelia navikų (HEK293 fonas)
- Paraiškos
- CD20 antikūnų ir bispecifinių antikūnų kūrimas; CAR-T ląstelių terapija; ADCC/CDC tyrimai; srauto citometrija; biologinių preparatų stiprumo tyrimai; B ląstelių antigenų tyrimai
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- GMO statusas
- GMO-S1
- Išsami informacija apie GMO statusą
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a CD20 (MS4A1) expression construct for therapeutic antibody and immune effector function studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
- Ląstelių tipas
- Epitelio ląstelės
- Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
- maždaug 24–36 valandos
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- HEK293-CD20 (Cytion katalogo numeris 305987)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A8V4
05Išraiška ir jautrumas
- Išreikšti receptoriai
- CD20
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS, 1 mM natrio piruvatu, 10 mM HEPES, 1 % NEAA. Pridėkite geneticino (G418-Sulfat), kad galutinė koncentracija būtų 1 mg/ml.
- Disociacijos reagentas
- Trypsino ir EDTA
- Subkultūrinis auginimas
- Įprastinėms adherentinėms ląstelių kultūroms: Kad pašalintumėte visą likusią terpę, iš adherentinių ląstelių išsiurbkite seną terpę ir nuplaukite jas PBS. Išsiurbę PBS, įpilkite reikiamą kiekį tripsino ir EDTA tirpalo, atsižvelgiant į kultūros indo dydį (pvz., 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai), ir inkubuokite kambario arba 37 °C temperatūroje, kol ląstelės atsiskirs (5-10 min.). Stebėkite atsiskyrimą per mikroskopą ir, jei reikia, švelniai palieskite indą, kad ląstelės išsilaisvintų. Kai ląstelės atsiskiria, įpilkite pilną terpę, kad būtų inaktyvuotas tripsinas/EDTA, atsargiai reuspenduokite ląsteles ir perkelkite alikvotą ląstelių suspensijos į naują auginimo indą su šviežia terpe. Įstatykite indą į inkubatorių, kuriame nustatyta 37 °C temperatūra ir 5 %CO2, o terpę keiskite kas 2-3 dienas.
- Skaidymo santykis
- 1–5
- Sėjos tankis
- 2–4 x 104 ląstelės/cm2
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
Po atšildymo suskirstykite ląsteles santykiu 1:2-1:3 į T25 kolbas ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso bei sukibti (jei tai adherencinės kultūros) mažiausiai 24 valandas.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- Vaisius
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Atsakomybės apribojimas
- Mūsų ląstelės teikiamos tik in vitro laboratoriniams tyrimams ir nėra skirtos klinikiniam ar diagnostiniam naudojimui, jos taip pat nėra skirtos žmonėms ar naudojamos veterinarijos tikslais. Naudotojai privalo laikytis visų galiojančių rekomendacijų ir taisyklių, taikomų šių ląstelių tvarkymui ir naudojimui mokslinių tyrimų aplinkoje.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Taikomos susitarimai su trečiosiomis šalimis
- Taip


.jpg)