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B-LCL-CDG4
Cell line · Référence du produit 302015
B-LCL-CDG4 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG...
Personnalisation / Recommandations
- B-LCL-CDG4Cell line€800.00
Recommandé (lot le plus récent)
01Informations générales
- Description
- B-LCL-CDG4 est une lignée de lymphocytes B transformés par l'EBV, dérivée d'une jeune fille atteinte de CDAII. Le CDAII est une anémie génétique rare, affiliée à la classe des troubles de la glycosylation CDG. Les patients atteints de CDAII présentent un défaut dans le gène SEC23B, composant COPII, qui est impliqué dans le système de transport intracellulaire des protéines (en particulier le bourgeonnement vésiculaire à partir du RE). Le patient concerné est homozygote pour la mutation de ce gène. La bande 3 de la glycoprotéine des membranes érythrocytaires est sous glycosylée par une glycosylation aberrante des motifs polylactosamine des glycoprotéines mais pas des glycosphingolipides. La bande 3 des érythrocytes CDA II présente donc des oligosaccharides tronqués de type hybride. Cela indique un défaut supplémentaire dans les enzymes de glycosylation du Golgi, la mannosidase II ou la Nacetylglucosaminyltransférase II.
- Tissu
- Sang périphérique
- Maladie
- Troubles congénitaux de la glycosylation
- Applications
- Génotypage des effets de la CDG dans les cellules immunitaires, tests fonctionnels (par exemple, antigènes de surface des cellules B), tests de médicaments cytotoxiques, analyse mutationnelle, analyse des mécanismes apoptotiques, typage HLA, impact de la glycosylation défectueuse de glycoprotéines cellulaires distinctes sur diverses fonctions.
02Classification
- Organisme
- Humain
- Sexe
- Femme
- Propriétés de croissance
- Suspension
- Niveau de biosécurité
- 2
03Caractéristiques
- Morphologie
- Cellules rondes
- Type de cellule
- Lymphocyte B
04Identifiants
- Référence
- B-LCL-CDG4 (numéro de catalogue 302015 de Cytion)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A9Y2
05Expression et sensibilité
- Antigènes de surface
- CD15 (Lewis x)+, CD15s (sialylés Lewis x)-, CD75s (sialylés lactosaminyl Noligosccharides)+, CD173 (groupe sanguin H)-, CD174 (groupe sanguin Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (sialylés Tn)-, CD176 (TF)+
- Expression des antigènes
- CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-, CMH classe I+, CMH classe II (HLA-DR)+
- Virus
- Transformant : EBV
06Manipulation et culture
- Milieu de culture
- RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10 % de FBS inactivé à la chaleur
- Repiquage
- Maintenez les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu. Démarrez les cultures avec une densité de 2 x 105 cellules/ml et maintenez la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 x 105 et 5 x 105 cellules/ml pour une croissance optimale.
- Renouvellement des fluides
- Une fois que la couleur moyenne a viré au jaune
- Récupération après le dégel
- Moyen
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Contrôle qualité et cryoconservation
- Stérilité
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.
Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donateur
- Âge du donneur
- Enfant
- Origine ethnique
- Caucasien
09Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Un accord de transfert de matériel est requis
- Oui