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B-LCL-CDG4
ティッシュ
末梢血
病気
先天性糖鎖形成異常症

B-LCL-CDG4

Cell line · 製品番号 302015

B-LCL-CDG4 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG...

€800.00税・送料別

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01概要

説明
B-LCL-CDG4は、CDAIIの少女に由来するEBV形質転換Bリンパ球細胞株である。CDAIIは稀な遺伝性貧血で、CDG糖鎖異常症に属する。CDAII患者は、細胞内タンパク質輸送系(特に小胞体からの小胞出芽)に関与するCOPII構成因子SEC23B遺伝子に欠損を有する。それぞれの患者はこの遺伝子の変異がホモ接合体である。赤血球膜のバンド3糖タンパク質は、糖タンパク質のポリラクトサミンモチーフのグリコシル化異常によってグリコシル化されているが、スフィンゴ糖脂質のグリコシル化異常によってグリコシル化されていない。このことはゴルジ糖鎖形成酵素であるマンノシダーゼIIあるいはナセチルグルコサミニルトランスフェラーゼIIの欠損を示唆している。
ティッシュ
末梢血
病気
先天性糖鎖形成異常症
用途
免疫細胞におけるCDG効果の遺伝子型判定、機能検査(B細胞表面抗原など)、細胞傷害性薬剤の検査、突然変異解析、アポトーシス機構の解析、HLA型判定、異なる細胞糖タンパク質のグリコシル化欠損が多様な機能に及ぼす影響。

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
サスペンション
バイオセーフティレベル
2

03特徴

形態学
丸い細胞
細胞の種類
Bリンパ球

04識別子

引用
B-LCL-CDG4(Cytion カタログ番号 302015)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_A9Y2

05発現と感受性

表面抗原
CD15(ルイスx)+、CD15s(シアル化ルイスx)-、CD75s(シアル化ラクトサミニルノリゴ糖)+、CD173(血液型H)-、CD174(血液型ルイスy)-、CD175(Tn)-、CD175s(シアル化Tn)-、CD176(TF)+。
抗原発現
CD19+、CD20+、CD37+、CD43+、CD44+、CD45+、CD45R0-、MHCクラスI+、MHCクラスII(HLA-DR)+。
ウイルス
形質転換体EBV

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10%熱不活性化FBSを添加する。
継代培養
培養液を定期的に追加または交換して培養を維持する。培養開始時の細胞密度は2×10⁵細胞/mlとし、最適な増殖のため細胞濃度を3×10⁵~5×10⁵細胞/mlの範囲に保つ。
流体の更新
ミディアムカラーが黄色に変わったら
解凍後の回復
ミディアム
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
子供
民族
白人