Preskoči na vsebino
B-LCL-CDG4
Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Prirojene motnje glikozilacije

Dokumenti

B-LCL-CDG4

Cell line · Številka izdelka 302015

B-LCL-CDG4 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis
B-LCL-CDG4 je z EBV transformirana celična linija limfocitov B, pridobljena od mladega dekleta s CDAII. CDAII je redka genetska anemija, ki spada v razred glikozilacijskih motenj CDG. Bolniki s CDAII imajo okvaro v genu SEC23B, ki je sestavni del COPII in je vključen v sistem znotrajceličnega prenosa beljakovin (zlasti vezikularno izločanje iz ER). Bolnik je homozigot za mutacijo tega gena. Glikoprotein Band 3 membran eritrocitov je premalo glikoziliran zaradi aberantne glikozilacije polilaktozaminskih motivov glikoproteinov, ne pa tudi glikofingolipidov, zato ima Band 3 eritrocitov CDA II skrajšane oligosaharide hibridnega tipa. To kaže na dodatno okvaro encimov Golgijeve glikozilacije mannozidaze II ali nacetilglukozaminiltransferaze II.
Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Prirojene motnje glikozilacije
Uporaba
Genotipizacija učinkov CDG v imunskih celicah, funkcionalno testiranje (npr. površinski antigeni celic B), testiranje citotoksičnih zdravil, mutacijska analiza, analiza apoptotičnih mehanizmov, tipizacija HLA, vpliv pomanjkljive glikozilacije različnih celičnih glikoproteinov na različne funkcije.

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Okrogle celice
Vrsta celice
Limfocit B

04Identifikatorji

Navajanje vira
B-LCL-CDG4 (kataloška številka Cytion 302015)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y2

05Izražanje in dovzetnost

Površinski antigeni
CD15 (Lewis x)+, CD15s (sialilirani Lewis x)-, CD75s (sialilirani laktozaminililni noligosharidi)+, CD173 (krvna skupina H)-, CD174 (krvna skupina Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (sialilirani Tn)-, CD176 (TF)+
Ekspresija antigena
CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-, MHC razreda I+, MHC razreda II (HLA-DR)+
Virusi
Transformant: EBV

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % toplotno aktiviranega FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Kulture vzdržujte z rednim dodajanjem ali zamenjavo gojišča. Kulture začnite z gostoto 2 x 105 celic/ml in za optimalno rast ohranjajte koncentracijo celic v območju od 3 x 105 do 5 x 105 celic/ml.
Obnova tekočine
Ko se srednja barva spremeni v rumeno
Obnova po odtaljevanju
Srednja
Odtaljevanje in gojenje

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Otrok
Etnična pripadnost
Kavkaški