Премини към съдържанието
B-LCL-CDG4
Тъкан
Периферна кръв
Заболяване
Вродени нарушения на гликозилирането

Документи

B-LCL-CDG4

Cell line · Номер на продукта 302015

B-LCL-CDG4 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание
B-LCL-CDG4 е трансформирана с EBV клетъчна линия от В лимфоцити, получена от младо момиче с CDAII. CDAII е рядка генетична анемия, свързана с класа на CDG нарушенията на гликозилирането. Пациентите с CDAII имат дефект в гена на COPII компонента SEC23B, който участва във вътреклетъчната система за пренос на протеини (по-специално везикуларното пъпкуване от ER). Съответният пациент е хомозиготен за мутацията в този ген. Гликопротеинът Band 3 от мембраните на еритроцитите е недостатъчно гликозилиран чрез аберантно гликозилиране на полилактозаминовите мотиви на гликопротеините, но не и на гликосфинголипидите, като по този начин Band 3 на еритроцитите CDA II има съкратени олигозахариди от хибриден тип. Това сочи за допълнителен дефект в ензимите за гликозилиране на Голджи - манозидаза II или нацетилглюкозаминтрансфераза II.
Тъкан
Периферна кръв
Заболяване
Вродени нарушения на гликозилирането
Приложения
Генотипиране на ефектите на CDG в имунните клетки, функционално тестване (напр. повърхностни антигени на В-клетките), тестване на цитотоксични лекарства, мутационен анализ, анализ на апоптотични механизми, HLA-типизиране, въздействие на дефектното гликозилиране на различни клетъчни гликопротеини върху различни функции.

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Кръгли клетки
Тип клетка
В лимфоцит

04Идентификатори

Източник
B-LCL-CDG4 (каталожен номер 302015 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_A9Y2

05Проява и предразположеност

Повърхностни антигени
CD15 (Lewis x)+, CD15s (сиалиран Lewis x)-, CD75s (сиалирани лактозаминил нолигосхариди)+, CD173 (кръвна група H)-, CD174 (кръвна група Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (сиалиран Tn)-, CD176 (TF)+
Експресия на антигена
CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-, MHC Cl.I+, MHC Class II (HLA-DR)+
Вируси
Трансформатор: EBV

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% топлинно активиран FBS
Пресаждане
Поддържайте културите, като периодично добавяте или подменяте средата. Започнете културите с плътност 2 x 105 клетки/ml и поддържайте концентрацията на клетките в диапазона от 3 x 105 до 5 x 105 клетки/ml за оптимален растеж.
Обновяване на течността
След като цветът на средата се промени в жълт
Възстановяване след размразяване
Среден
Размразяване и култивиране

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Дете
Етническа принадлежност
Кавказки