Gå direkt till innehållet
B-LCL-CDG4
Vävnad
Perifert blod
Sjukdom
Medfödda glykosyleringsstörningar

B-LCL-CDG4

Cell line · Produktnummer 302015

B-LCL-CDG4 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young girl with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG...

€800.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning
B-LCL-CDG4 är en EBV-transformerad B-lymfocytcellinje som härrör från en ung flicka med CDAII. CDAII är en sällsynt genetisk anemi som tillhör klassen CDG-glykosyleringsstörningar. CDAII-patienter har en defekt i COPII-komponenten SEC23B-genen som är involverad i det intracellulära proteintransportsystemet (i synnerhet vesikulär knoppning från ER). Respektive patient är homozygot för mutationen i denna gen. Band 3 glykoprotein av erytrocytmembran är underglykosylerat genom avvikande glykosylering av polylaktosaminmotiv av glykoproteiner men inte av glykosfingolipider, så band 3 av CDA II erytrocyter har trunkerade oligosackarider av hybridtyp. Detta pekar på en ytterligare defekt i Golgi glykosyleringsenzymerna mannosidas II eller Nacetylglukosaminyltransferas II.
Vävnad
Perifert blod
Sjukdom
Medfödda glykosyleringsstörningar
Ansökningar
Genotypning av CDG-effekter i immunceller, funktionstestning (t.ex. ytantigener i B-celler), testning av cytotoxiska läkemedel, mutationsanalys, analys av apoptotiska mekanismer, HLA-typning, inverkan av defekt glykosylering av olika cellulära glykoproteiner på olika funktioner.

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Upphängning
Biosäkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Runda celler
Celltyp
B-lymfocyt

04Identifierare

Källa
B-LCL-CDG4 (Cytion katalognummer 302015)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y2

05Uttryck och mottaglighet

Ytantigener
CD15 (Lewis x)+, CD15s (sialylerad Lewis x)-, CD75s (sialylerad laktosaminyl-noligosackarider)+, CD173 (blodgrupp H)-, CD174 (blodgrupp Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (sialylerad Tn)-, CD176 (TF)+
Antigenuttryck
CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-, MHC Cl.I+, MHC Class II (HLA-DR)+
Virus
Transformant: EBV

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% värmeinaktiverad FBS
Vidareodling
Underhåll odlingarna genom att regelbundet tillsätta eller byta ut odlingsmediet. Inled odlingarna med en densitet på 2 x 105 celler/ml och håll cellkoncentrationen inom intervallet 3 x 105 till 5 x 105 celler/ml för optimal tillväxt.
Vätskeförnyelse
När medelfärgen övergått till gult
Återhämtning efter upptining
Medium
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Barn
Etnicitet
Kaukasisk