Lx-2

01Description

02Informations générales

Description

LX-2 est une lignée de cellules stellaires hépatiques humaines qui est devenue un modèle standard pour l'étude de la fibrose hépatique. Cette lignée cellulaire a été immortalisée à partir de cellules stellaires hépatiques humaines primaires, conservant de nombreuses caractéristiques in vivo nécessaires à l'étude de l'activation des cellules stellaires, de l'interaction avec d'autres types de cellules hépatiques et de la réponse aux signaux inflammatoires. Les cellules LX-2 sont particulièrement connues pour leur utilité dans la recherche axée sur la pathogenèse de la fibrose hépatique et l'évaluation des médicaments anti-fibrotiques. Elles expriment une variété de marqueurs relatifs à la fonction des cellules stellaires et à la fibrogenèse, notamment l'actine musculaire lisse alpha (α-SMA), la protéine acide fibrillaire gliale (GFAP) et le collagène de type I.

Cette lignée cellulaire constitue un modèle avantageux en raison de son phénotype stable et de sa réactivité aux cytokines et aux facteurs de croissance typiquement impliqués dans les processus de maladie hépatique. Les cellules LX-2 sont utilisées pour étudier les mécanismes cellulaires et moléculaires qui sous-tendent la fibrose hépatique, notamment le rôle des cellules stellaires dans le dépôt de la matrice extracellulaire et la modulation de ces processus par des agents thérapeutiques. Ces cellules offrent un environnement in vitro reproductible et contrôlé qui permet un criblage à haut débit et des études mécanistiques, ce qui les rend précieuses pour la recherche fondamentale et le développement pharmaceutique ciblant les maladies du foie.

Tissu

Foie

Synonymes

• Lieming xu-2

03Classification

Organisme

Humain

Sexe

Homme

Propriétés de croissance

Adepte

Niveau de biosécurité

1

04Caractéristiques

Morphologie

Épithéliale

Type de cellule

Cellules stellaires hépatiques

05Identifiants

Référence

Lx-2 (numéro de catalogue Cytion 305039)

Numéro d'identification fiscale NCBI

9606

Cellosaurus

CVCL_5792

06Manipulation et culture

Milieu de culture

DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)

Atmosphère d'incubation

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires

Compléter le milieu avec 2% de FBS

Réactif de dissociation

Accutase

Repiquage

Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.

Renouvellement des fluides

2 à 3 fois par semaine

Décongélation et mise en culture

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation

Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.

Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur

Âge non spécifié

09Aspects juridiques et sécurité

Consignes de sécurité

Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.

Garantie

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie

Un accord de transfert de matériel est requis

Oui

10Détails du produit

Tableau de composition