Lx-2

01Apraksts

02Vispārīga informācija

Apraksts

LX-2 ir cilvēka aknu stellātu šūnu līnija, kas ir kļuvusi par standarta modeli aknu fibrozes izpētei. Šī šūnu līnija tika imortalizēta no primārajām cilvēka aknu stellātu šūnām, saglabājot daudzas in vivo īpašības, kas nepieciešamas, lai pētītu stellātu šūnu aktivāciju, mijiedarbību ar citiem aknu šūnu tipiem un reakciju uz iekaisuma signāliem. LX-2 šūnas ir īpaši noderīgas pētījumos, kas vērsti uz aknu fibrozes patoģenēzi un pretfibrotisko zāļu novērtēšanu. Tās ekspresē dažādus marķierus, kas saistīti ar stellātu šūnu funkciju un fibroģenēzi, tostarp alfa-gludā muskuļu aktīnu (α-SMA), gliālo fibrilāro skābo proteīnu (GFAP) un I tipa kolagēnu.

Šūnu līnija ir izdevīgs modelis, jo tai ir stabils fenotips un tā reaģē uz citokīniem un augšanas faktoriem, kas parasti ir saistīti ar aknu slimību procesiem. LX-2 šūnas izmanto, lai pētītu šūnu un molekulāros mehānismus, kas ir aknu fibrozes pamatā, tostarp zvaigžņveida šūnu lomu ekstracelulārā matriksa izgulsnēšanā un šo procesu modulāciju ar terapeitiskiem līdzekļiem. Šīs šūnas nodrošina reproducējamu un kontrolētu in vitro vidi, kas ļauj veikt augstas veiktspējas skrīningu un mehānistiskus pētījumus, padarot tās vērtīgas gan fundamentālajos pētījumos, gan farmācijas izstrādē, kas vērsta uz aknu slimībām.

Audums

Aknas

Sinonīmi

• Lieming xu-2

03Klasifikācija

Organisms

Cilvēks

Sekss

Vīrietis

Augšanas īpašības

Atbalstītājs

Bioloģiskās drošības līmenis

1

04Raksturlielumi

Morfoloģija

Epitēlija

Šūnu tips

Aknu zvaigžņotās šūnas

05Identifikatori

Atsauce

Lx-2 (Cytion kataloga numurs 305039)

NCBI nodokļu identifikācijas numurs

9606

Cellosaurus

CVCL_5792

06Apstrāde un audzēšana

Barotne

DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)

Inkubācijas vide

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi

Papildināt barotni ar 2% FBS

Disociācijas reaģents

Accutase

Pārstādīšana

Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.

Šķidruma atjaunošana

2 līdz 3 reizes nedēļā

Atkausēšana un kultivēšana

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne

Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.

Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums

Vecums nav precizēts

09Juridiskie jautājumi un drošība

Drošības pasākumi

Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.

Garantija

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu

Nepieciešams materiālu nodošanas līgums

Jā

10Informācija par produktu

Sastāva tabula