Lx-2

01Beskrivelse

02Generelle oplysninger

Beskrivelse

LX-2 er en human hepatisk stellatcellelinje, som er blevet en standardmodel til undersøgelse af leverfibrose. Denne cellelinje blev udødeliggjort fra primære humane hepatiske stellatceller og bevarede mange af de in vivo-egenskaber, der er nødvendige for at studere stellatcelleaktivering, interaktion med andre levercelletyper og respons på inflammatoriske signaler. LX-2-celler er især kendt for deres anvendelighed i forskning med fokus på patogenesen af leverfibrose og evaluering af anti-fibrotiske lægemidler. De udtrykker en række markører, der er relevante for stellatcellefunktion og fibrogenese, herunder alfa-glat muskelaktin (α-SMA), glial fibrillary acidic protein (GFAP) og type I-kollagen.

Cellelinjen er en fordelagtig model på grund af dens stabile fænotype og følsomhed over for cytokiner og vækstfaktorer, der typisk er involveret i leversygdomsprocesser. LX-2-celler bruges til at undersøge de cellulære og molekylære mekanismer, der ligger til grund for leverfibrose, herunder stellatcellernes rolle i aflejring af ekstracellulær matrix og modulering af disse processer med terapeutiske midler. Disse celler giver et reproducerbart og kontrolleret in vitro-miljø, der understøtter high-throughput screening og mekanistiske undersøgelser, hvilket gør dem værdifulde for både grundforskning og farmaceutisk udvikling rettet mod leversygdomme.

Væv

Lever

Synonymer

• Lieming xu-2

03Klassificering

Organisme

Menneske

Køn

Mand

Vækstegenskaber

Tilhænger

Biosikkerhedsniveau

1

04Egenskaber

Morfologi

Epitelial

Celletype

Stellatceller i leveren

05Identifikatorer

Kildehenvisning

Lx-2 (Cytion-katalognummer 305039)

NCBI-skattenummer

9606

Cellosaurus

CVCL_5792

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium

DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)

Inkubationsatmosfære

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud

Suppler mediet med 2 % FBS

Dissociationsreagens

Accutase

Oddyrkning

Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.

Væskeudskiftning

2 til 3 gange om ugen

Optøning og dyrkning

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium

Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.

Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder

Uspecificeret alder

09Juridiske forhold og sikkerhed

Sikkerhedsforanstaltninger

Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.

Garanti

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring

Der kræves en aftale om overførsel af materiale

Ja

10Produktoplysninger

Sammensætningstabel