Lx-2

01Descrizione

02Informazioni generali

Descrizione

LX-2 è una linea cellulare stellata epatica umana che è diventata un modello standard per lo studio della fibrosi epatica. Questa linea cellulare è stata immortalata da cellule stellate epatiche umane primarie, conservando molte delle caratteristiche in vivo necessarie per lo studio dell'attivazione delle cellule stellate, dell'interazione con altri tipi di cellule epatiche e della risposta ai segnali infiammatori. Le cellule LX-2 sono particolarmente note per la loro utilità nella ricerca sulla patogenesi della fibrosi epatica e nella valutazione di farmaci antifibrotici. Esprimono una serie di marcatori rilevanti per la funzione delle cellule stellate e la fibrogenesi, tra cui l'actina muscolare alfa-liscia (α-SMA), la proteina acida fibrillare gliale (GFAP) e il collagene di tipo I.

Questa linea cellulare offre un modello vantaggioso grazie al suo fenotipo stabile e alla sua reattività alle citochine e ai fattori di crescita tipicamente coinvolti nei processi di malattia epatica. Le cellule LX-2 sono utilizzate per esaminare i meccanismi cellulari e molecolari alla base della fibrosi epatica, compreso il ruolo delle cellule stellate nella deposizione della matrice extracellulare e la modulazione di questi processi da parte di agenti terapeutici. Queste cellule forniscono un ambiente in vitro riproducibile e controllato che supporta lo screening high-throughput e gli studi meccanicistici, rendendole preziose sia per la ricerca di base che per lo sviluppo farmaceutico mirato alle malattie del fegato.

Tessuto

Fegato

Sinonimi

• Lieming xu-2

03Classificazione

Organismo

Umano

Sesso

Maschio

Proprietà di crescita

Aderente

Livello di biosicurezza

1

04Caratteristiche

Morfologia

Epiteliale

Tipo di cellula

Cellule stellate epatiche

05Identificatori

Riferimento bibliografico

Lx-2 (numero di catalogo Cytion 305039)

Codice fiscale NCBI

9606

Cellosaurus

CVCL_5792

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura

DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)

Atmosfera di incubazione

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

Integratori

Integrare il terreno di coltura con il 2% di FBS

Reagente di dissociazione

Accutase

Subcoltura

Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.

Rinnovo dei fluidi

da 2 a 3 volte alla settimana

Scongelamento e coltura

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato

Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.

Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori

Età non specificata

09Aspetti legali e di sicurezza

Misure di sicurezza

Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.

Garanzia

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia

È richiesto un accordo di trasferimento di materiale

Sì

10Dettagli sul prodotto

Tabella delle composizioni