Lx-2

01Descrição

02Informações gerais

Descrição

A LX-2 é uma linha de células estreladas hepáticas humanas que se tornou um modelo padrão para o estudo da fibrose hepática. Esta linha celular foi imortalizada a partir de células estreladas hepáticas humanas primárias, mantendo muitas das caraterísticas in vivo necessárias para o estudo da ativação das células estreladas, da interação com outros tipos de células hepáticas e da resposta a sinais inflamatórios. As células LX-2 são particularmente conhecidas pela sua utilidade na investigação centrada na patogénese da fibrose hepática e na avaliação de fármacos anti-fibróticos. Expressam uma variedade de marcadores relevantes para a função das células estreladas e para a fibrogénese, incluindo a alfa-actina do músculo liso (α-SMA), a proteína glial fibrilar ácida (GFAP) e o colagénio de tipo I.

Esta linha celular constitui um modelo vantajoso devido ao seu fenótipo estável e à sua capacidade de resposta a citocinas e factores de crescimento tipicamente envolvidos nos processos de doença hepática. As células LX-2 são utilizadas para examinar os mecanismos celulares e moleculares subjacentes à fibrose hepática, incluindo o papel das células estreladas na deposição da matriz extracelular e a modulação destes processos por agentes terapêuticos. Estas células proporcionam um ambiente in vitro reprodutível e controlado que permite o rastreio de elevado rendimento e estudos mecanicistas, o que as torna valiosas tanto para a investigação fundamental como para o desenvolvimento de produtos farmacêuticos destinados a doenças hepáticas.

Tecido

Fígado

Sinónimos

• Lieming xu-2

03Classificação

Organismo

Humano

Sexo

Masculino

Propriedades de crescimento

Aderente

Nível de biossegurança

1

04Características

Morfologia

Epitelial

Tipo de célula

Células estreladas hepáticas

05Identificadores

Referência

Lx-2 (número de catálogo da Cytion 305039)

Número de identificação fiscal do NCBI

9606

Cellosaurus

CVCL_5792

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura

DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)

Atmosfera de incubação

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos

Suplementar o meio com 2% de FBS

Reagente de dissociação

Accutase

Subcultura

Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.

Renovação de fluidos

2 a 3 vezes por semana

Descongelamento e cultura

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação

Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.

Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador

Idade não especificada

09Aspectos legais e de segurança

Precauções de segurança

Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.

Garantia

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia

É necessário um Acordo de Transferência de Material

Sim

10Detalhes do produto

Tabela de composição