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Lx-2
Gewebe
Leber
Synonyme
Lieming xu-2

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Lx-2

Cell line · Artikelnummer 305039

LX-2 ist eine menschliche Lebersternzelllinie, die sich zu einem Standardmodell für die Erforschung der Leberfibrose entwickelt hat. Diese Zelllinie wurde aus primären menschlichen …

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01Beschreibung

02Allgemeine Informationen

Beschreibung

LX-2 ist eine humane hepatische Stellat-Zelllinie, die sich zu einem Standardmodell für die Untersuchung der Leberfibrose entwickelt hat. Diese Zelllinie wurde aus primären menschlichen Leberstellatzellen immortalisiert, wobei viele der in vivo-Eigenschaften erhalten blieben, die für die Untersuchung der Stellatzellaktivierung, der Interaktion mit anderen Leberzelltypen und der Reaktion auf Entzündungssignale erforderlich sind. LX-2-Zellen sind besonders für ihre Nützlichkeit bei der Erforschung der Pathogenese der Leberfibrose und der Bewertung antifibrotischer Medikamente bekannt. Sie exprimieren eine Vielzahl von Markern, die für die Funktion der Stellatzellen und die Fibrogenese von Bedeutung sind, darunter Alpha-Glattmuskel-Aktin (α-SMA), gliales fibrilläres saures Protein (GFAP) und Typ-I-Kollagen.

Die Zelllinie ist ein vorteilhaftes Modell, da sie einen stabilen Phänotyp aufweist und auf Zytokine und Wachstumsfaktoren reagiert, die typischerweise bei Lebererkrankungen eine Rolle spielen. LX-2-Zellen werden verwendet, um die der Leberfibrose zugrunde liegenden zellulären und molekularen Mechanismen zu untersuchen, einschließlich der Rolle der Stellatazellen bei der Ablagerung extrazellulärer Matrix und der Modulation dieser Prozesse durch therapeutische Wirkstoffe. Diese Zellen bieten eine reproduzierbare und kontrollierte In-vitro-Umgebung, die ein Hochdurchsatz-Screening und mechanistische Studien unterstützt, was sie sowohl für die Grundlagenforschung als auch für die Entwicklung von Arzneimitteln für Lebererkrankungen wertvoll macht.

Gewebe
Leber
Synonyme
  • Lieming xu-2

03Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

04Merkmale

Morphologie
Epithelial
Zelltyp
Hepatische Stellat-Zellen

05Bezeichner

Quellenangabe
Lx-2 (Cytion-Katalognummer 305039)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_5792

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 2% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Alter nicht spezifiziert

10Produktdetails

Zusammensetzungstabelle