Lx-2

01Beskrivelse

02Generell informasjon

Beskrivelse

LX-2 er en human hepatisk stellatcellelinje som har blitt en standardmodell for studier av leverfibrose. Denne cellelinjen er udødeliggjort fra primære humane hepatiske stellatceller, og har beholdt mange av de in vivo-egenskapene som er nødvendige for å studere aktivering av stellatceller, interaksjon med andre levercelletyper og respons på inflammatoriske signaler. LX-2-celler er spesielt kjent for sin anvendelighet i forskning som fokuserer på patogenesen av leverfibrose og evaluering av anti-fibrotiske legemidler. De uttrykker en rekke markører som er relevante for stellatcellefunksjon og fibrogenese, blant annet alfa-glatt muskelaktin (α-SMA), glial fibrillært surt protein (GFAP) og type I-kollagen.

Cellelinjen er en fordelaktig modell på grunn av sin stabile fenotype og respons på cytokiner og vekstfaktorer som vanligvis er involvert i leversykdomsprosesser. LX-2-celler brukes til å undersøke de cellulære og molekylære mekanismene som ligger til grunn for leverfibrose, inkludert stellatcellenes rolle i ekstracellulær matriksdeponering og modulering av disse prosessene ved hjelp av terapeutiske midler. Disse cellene gir et reproduserbart og kontrollert in vitro-miljø som støtter screening med høy gjennomstrømning og mekanistiske studier, noe som gjør dem verdifulle for både grunnforskning og legemiddelutvikling rettet mot leversykdommer.

Vev

Lever

Synonymer

• Lieming xu-2

03Klassifisering

Organisme

Menneske

Sex

Mann

Vekstegenskaper

Tilhenger

Biosikkerhetsnivå

1

04Egenskaper

Morfologi

Epitelial

Celletype

Stellate leverceller

05Identifikatorer

Kildehenvisning

Lx-2 (Cytion-katalognummer 305039)

NCBI-skattenummer

9606

Cellosaurus

CVCL_5792

06Håndtering og kultur

Næringsmedium

DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)

Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd

Suppler mediet med 2 % FBS

Dissosiasjonsmiddel

Accutase

Subkultivering

Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.

Væskefornyelse

2 til 3 ganger per uke

Tining og dyrking

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium

Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.

Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder

Uspesifisert alder

09Juridisk og sikkerhet

Sikkerhetsregler

Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.

Garanti

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring

Avtale om materialoverføring kreves

Ja

10Produktdetaljer

Sammensetningstabell