- Tisu
- Ginjal Janin
- Penyakit
- Telah diubah/diabadikan; tidak bersifat tumorigenik (latar belakang sel HEK293)
Dokumen
HEK293-CTLA4
Cell line · Nomor produk 305423
Penafian: Harga yang ditampilkan untuk lini sel hanya berlaku bagi pelanggan dari kalangan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya...
Penyesuaian / Rekomendasi
- HEK293-CTLA4Cell line€1,900.00
01Informasi umum
- Deskripsi
Pemberitahuan: Harga yang ditampilkan untuk lini sel ini khusus berlaku bagi pelanggan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya sekitar €6.250.
Jika Anda mewakili entitas komersial atau tidak yakin kategori mana yang berlaku, silakan hubungi kami.Lini sel HEK293-CTLA4 adalah lini sel HEK293 rekombinan yang stabil, yang direkayasa untuk mengekspresikan reseptor CTLA4 pada tingkat sedang-rendah, sekitar 4.000 molekul per sel. Lini sel ini dikembangkan menggunakan teknologi landing pad dari inscreenex, yang memastikan integrasi gen CTLA4 yang tepat dan dapat direproduksi pada lokus genomik tertentu yang telah divalidasi sebelumnya. CTLA4, juga dikenal sebagai CD152, adalah protein titik pemeriksaan imun yang memainkan peran penting dalam mengatur aktivasi sel T. Dengan bersaing dengan reseptor stimulasi CD28 untuk berikatan dengan molekul B7 (CD80 dan CD86) pada sel penyaji antigen, CTLA4 menghambat respons imun, sehingga mempertahankan toleransi diri dan mencegah autoimunitas. CTLA4 merupakan target utama dalam imunoterapi kanker, terutama untuk obat-obatan seperti ipilimumab, yang bertujuan meningkatkan imunitas antitumor dengan memblokir titik kontrol ini dan mengaktifkan sel T.
Ekspresi CTLA4 pada garis sel ini dikonfirmasi menggunakan sitometri aliran dengan antibodi spesifik target, memastikan kepadatan reseptor yang andal dan konsisten di seluruh populasi sel.
- Tisu
- Ginjal Janin
- Penyakit
- Telah diubah/diabadikan; tidak bersifat tumorigenik (latar belakang sel HEK293)
- Aplikasi
- Penelitian tentang penghambat titik kontrol; pengembangan antibodi yang menargetkan CTLA-4 (ipilimumab, analog tremelimumab); uji ko-stimulasi sel T; skrining imuno-onkologi; rekayasa antibodi bispesifik
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Perempuan
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Status GMO
- GMO-S1
- Rincian status GMO
- GMO-S1: This HEK293 variant contains a CTLA-4 expression construct for immune checkpoint research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Jenis sel
- Sel epitel
- Waktu penggandaan
- sekitar 24–36 jam
04Pengidentifikasi
- Referensi
- HEK293-CTLA4 (nomor katalog Cytion 305423)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G20
05Ekspresi dan kerentanan
- Reseptor yang diekspresikan
- CTLA4 (CD152)
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Lengkapi media dengan 10% FBS, 1 mM natrium piruvat, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Tambahkan Geneticin (G418-Sulfat) untuk mencapai konsentrasi akhir 1 mg / mL.
- Reagen disosiasi
- Tripsin-EDTA
- Perbanyakan sel
- Untuk kultur sel yang melekat secara rutin: Aspirasi media kultur lama dari sel yang melekat, dan cuci dengan PBS untuk menghilangkan media yang tersisa. Setelah menyedot PBS, tambahkan volume larutan Trypsin/EDTA yang sesuai berdasarkan ukuran bejana kultur (misalnya, 1 ml untuk labu T25, 3 ml untuk labu T75) dan inkubasi pada suhu kamar atau 37 ° C hingga sel terlepas (5-10 menit). Pantau pelepasan di bawah mikroskop, dan ketuk bejana dengan lembut jika perlu untuk melepaskan sel. Setelah terlepas, tambahkan media lengkap untuk menonaktifkan Trypsin/EDTA, resuspensi sel dengan hati-hati, dan pindahkan alikuot suspensi sel ke dalam bejana kultur baru yang berisi media segar. Tempatkan bejana dalam inkubator yang diatur pada suhu 37°C dengan 5%CO2, dan ganti medium setiap 2-3 hari.
- Rasio pemisahan
- 1 sampai 5
- Kepadatan penanaman
- 2 hingga 4 x 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, pisahkan sel dengan rasio 1:2 hingga 1:3 dalam labu T25 dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan dan melekat (untuk kultur yang melekat) setidaknya selama 24 jam.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- Janin
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Penafian
- Sel-sel kami disediakan untuk tujuan penelitian laboratorium in vitro secara eksklusif dan tidak dimaksudkan untuk penggunaan klinis atau diagnostik, dan juga tidak untuk diberikan kepada manusia atau digunakan untuk tujuan kedokteran hewan. Pengguna harus mematuhi semua pedoman dan peraturan yang berlaku untuk penanganan dan penggunaan sel ini dalam lingkungan penelitian.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Berlaku ketentuan perjanjian pihak ketiga
- Ya
.jpg)