
- Chusteczka
- Nerka płodu
- Choroba
- Zmodyfikowane/unieśmiertelnione; nie wywołujące nowotworów (na tle komórek HEK293)
Dokumenty
HEK293-CTLA4
Cell line · Numer produktu 305423
Zastrzeżenie: Podane ceny linii komórkowych dotyczą wyłącznie klientów akademickich i organizacji non-profit. W przypadku podmiotów komercyjnych ceny...
Dostosowanie / Zalecenia
- HEK293-CTLA4Cell line€1,900.00
01Informacje ogólne
- Opis
Zastrzeżenie: Podane ceny linii komórkowych dotyczą wyłącznie klientów akademickich lub organizacji non-profit. W przypadku podmiotów komercyjnych cena wynosi około 6 250 euro.
Jeśli reprezentujesz podmiot komercyjny lub nie masz pewności, która kategoria ma zastosowanie, prosimy o kontakt.Linia komórkowa HEK293-CTLA4 jest stabilną, rekombinowaną linią komórkową HEK293, zmodyfikowaną tak, aby wyrażała receptor CTLA4 na średnio-niskim poziomie, około 4000 cząsteczek na komórkę. Linia ta została opracowana przy użyciu technologii „landing pad” firmy inscreenex, zapewniającej precyzyjną i powtarzalną integrację genu CTLA4 w określonym, wstępnie zweryfikowanym locus genomowym. CTLA4, znany również jako CD152, jest białkiem punktu kontrolnego układu odpornościowego, które odgrywa kluczową rolę w regulacji aktywacji komórek T. Konkurując z receptorem stymulującym CD28 o wiązanie z cząsteczkami B7 (CD80 i CD86) na komórkach prezentujących antygen, CTLA4 hamuje reakcje immunologiczne, utrzymując w ten sposób tolerancję własną i zapobiegając autoimmunizacji. CTLA4 jest kluczowym celem w immunoterapii nowotworów, szczególnie w przypadku leków takich jak ipilimumab, których celem jest wzmocnienie odporności przeciwnowotworowej poprzez blokowanie tego punktu kontrolnego i aktywację komórek T.
Ekspresję CTLA4 w tej linii komórkowej potwierdzono za pomocą cytometrii przepływowej z użyciem przeciwciała specyficznego dla celu, zapewniając wiarygodną i spójną gęstość receptora w całej populacji komórek.
- Chusteczka
- Nerka płodu
- Choroba
- Zmodyfikowane/unieśmiertelnione; nie wywołujące nowotworów (na tle komórek HEK293)
- Zastosowania
- Badania nad inhibitorami punktów kontrolnych; opracowywanie przeciwciał skierowanych przeciwko CTLA-4 (ipilimumab, analogi tremelimumabu); testy kostymulacji komórek T; badania przesiewowe w dziedzinie immunoonkologii; inżynieria przeciwciał bispecyficznych
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Kobieta
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- GMO-S1
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- GMO-S1: This HEK293 variant contains a CTLA-4 expression construct for immune checkpoint research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Typ komórki
- Komórki nabłonkowe
- Czas podwojenia
- ok. 24–36 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- HEK293-CTLA4 (numer katalogowy Cytion 305423)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G20
05Ekspresja i podatność
- Receptory ulegające ekspresji
- CTLA4 (CD152)
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 1 mM pirogronianu sodu, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Dodać Geneticin (G418-Sulfat), aby osiągnąć końcowe stężenie 1 mg/ml.
- Odczynnik dysocjacyjny
- Trypsyna-EDTA
- Hodowla komórek w subkulturze
- W przypadku rutynowej hodowli komórek przylegających: Odessać starą pożywkę z przylegających komórek i przemyć je PBS w celu usunięcia pozostałości pożywki. Po odessaniu PBS, dodać odpowiednią objętość roztworu Trypsyna/EDTA w zależności od wielkości naczynia hodowlanego (np. 1 ml dla kolby T25, 3 ml dla kolby T75) i inkubować w temperaturze pokojowej lub 37°C do momentu odłączenia się komórek (5-10 minut). Monitoruj oderwanie pod mikroskopem i delikatnie postukaj w naczynie, jeśli to konieczne, aby uwolnić komórki. Po odłączeniu dodać pełną pożywkę w celu inaktywacji trypsyny/EDTA, delikatnie ponownie zawiesić komórki i przenieść porcję zawiesiny komórek do nowego naczynia hodowlanego zawierającego świeżą pożywkę. Umieść naczynie w inkubatorze ustawionym na 37°C z 5%CO2 i zmieniaj pożywkę co 2-3 dni.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 5
- Gęstość wysiewu
- 2 do 4 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu rozdzielić komórki w stosunku 1:2 do 1:3 w kolbach T25 i pozwolić komórkom na regenerację po procesie zamrażania i przyleganie (w przypadku hodowli adherentnych) przez co najmniej 24 godziny.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- Płód
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Zastrzeżenie
- Nasze komórki są dostarczane wyłącznie do celów badań laboratoryjnych in vitro i nie są przeznaczone do użytku klinicznego lub diagnostycznego, nie mogą być podawane ludziom ani wykorzystywane do celów weterynaryjnych. Użytkownicy muszą przestrzegać wszystkich obowiązujących wytycznych i przepisów dotyczących obchodzenia się z tymi komórkami i korzystania z nich w środowisku badawczym.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Obowiązują umowy z podmiotami zewnętrznymi
- Tak


.jpg)