Перейти до вмісту
HEK293-CTLA4
Тканина
Ембріональна нирка
Хвороба
Трансформовані/увічнені; непухлиногенні (на основі клітинної лінії HEK293)

Документи

HEK293-CTLA4

Cell line · Номер товару 305423

Застереження: Ціни, вказані для клітинних ліній, призначені виключно для клієнтів з академічного сектору та некомерційних організацій. Для комерційних організацій ціни...

€1,900.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис

Застереження: Ціни, вказані для клітинних ліній, призначені виключно для клієнтів з академічних та некомерційних організацій. Для комерційних організацій ціна становить приблизно 6 250 євро.
Якщо ви представляєте комерційну організацію або не впевнені, до якої категорії належите, будь ласка, зверніться до нас.


Клітинна лінія HEK293-CTLA4 — це стабільна рекомбінантна клітинна лінія HEK293, створена для експресії рецептора CTLA4 на середньо-низькому рівні, приблизно 4 000 молекул на клітину. Ця клітинна лінія була розроблена з використанням технології «landing pad» компанії inscreenex, що забезпечує точну та відтворювану інтеграцію гена CTLA4 у конкретний, попередньо валідований геномний локус. CTLA4, також відомий як CD152, є білком імунного контрольного пункту, який відіграє вирішальну роль у регулюванні активації Т-клітин. Конкуруючи зі стимулюючим рецептором CD28 за зв'язування з молекулами B7 (CD80 та CD86) на клітинах-презентерах антигену, CTLA4 пригнічує імунні реакції, тим самим підтримуючи аутотолерантність та запобігаючи аутоімунності. CTLA4 є ключовою мішенню в імунотерапії раку, зокрема для таких препаратів, як іпілімумаб, які спрямовані на посилення протипухлинного імунітету шляхом блокування цього контрольного пункту та активації Т-клітин.

Експресія CTLA4 у цій клітинній лінії була підтверджена за допомогою проточної цитометрії з використанням антитіла, специфічного до мішені, що забезпечило надійну та стабільну щільність рецепторів у клітинній популяції.

Тканина
Ембріональна нирка
Хвороба
Трансформовані/увічнені; непухлиногенні (на основі клітинної лінії HEK293)
Застосування
Дослідження інгібіторів контрольних точок; розробка антитіл, спрямованих проти CTLA4 (іпілімумаб, аналоги тремелімумабу); аналізи костимуляції Т-клітин; скринінг в галузі імуноонкології; розробка біспецифічних антитіл

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This HEK293 variant contains a CTLA-4 expression construct for immune checkpoint research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епітеліальні клітини
Час подвоєння
приблизно 24–36 годин

04Ідентифікатори

Посилання
HEK293-CTLA4 (номер за каталогом Cytion 305423)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_6G20

05Експресія та сприйнятливість

Рецептори, що експресуються
CTLA4 (CD152)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS, 1 мМ пірувату натрію, 10 мМ HEPES, 1% NEAA. Додайте генетин (G418-Sulfat) для досягнення кінцевої концентрації 1 мг/мл.
Реагент для дисоціації
Трипсин-ЕДТА
Пересадка в нове середовище
Для рутинного культивування адгезивних клітин: Аспіруйте старе культуральне середовище з адгезивних клітин і промийте їх PBS, щоб видалити залишки середовища. Після аспірації PBS додайте відповідний об'єм розчину трипсину/ЕДТА залежно від розміру культуральної посудини (наприклад, 1 мл для колби T25, 3 мл для колби T75) та інкубуйте при кімнатній температурі або 37°C до відокремлення клітин (5-10 хвилин). Спостерігайте за відшаруванням під мікроскопом і, якщо необхідно, обережно постукайте по посудині, щоб звільнити клітини. Після відокремлення додайте повне середовище для інактивації трипсину/ЕДТА, обережно ресуспендуйте клітини і перенесіть аліквоту клітинної суспензії в нову культуральну посудину зі свіжим середовищем. Помістіть посудину в інкубатор, налаштований на 37°C з 5% CO2, і міняйте середовище кожні 2-3 дні.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 5
Щільність висіву
Від 2 до 4 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги

Після розморожування розділіть клітини у співвідношенні 1:2 - 1:3 у колбах Т25 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування і склеїтися (для адгезивних культур) протягом щонайменше 24 годин.

Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
Плід

Вам також може знадобитися