
- Tkáň
- Fetální ledvina
- Nemoc
- Transformované/imortalizované; netumorogenní (na pozadí HEK293)
Dokumenty
HEK293-CTLA4
Cell line · Číslo výrobku 305423
Upozornění: Ceny uvedené u buněčných linií platí výhradně pro akademické a neziskové zákazníky. Pro komerční subjekty platí ceny...
Přizpůsobení / Doporučení
- HEK293-CTLA4Cell line€1,900.00
01Obecné informace
- Popis
Upozornění: Ceny uvedené u buněčných linií platí výhradně pro akademické a neziskové zákazníky. Pro komerční subjekty činí cena přibližně 6 250 EUR.
Pokud zastupujete komerční subjekt nebo si nejste jisti, do které kategorie spadáte, prosím nás kontaktujte.Buněčná linie HEK293-CTLA4 je stabilní rekombinantní buněčná linie HEK293, která byla geneticky upravena tak, aby exprimovala receptor CTLA4 na středně nízké úrovni, přibližně 4 000 molekul na buňku. Tato buněčná linie byla vyvinuta pomocí technologie „landing pad“ společnosti inscreenex, která zajišťuje přesnou a reprodukovatelnou integraci genu CTLA4 na specifickém, předem ověřeném genomovém lokusu. CTLA4, známý také jako CD152, je protein imunitního kontrolního bodu, který hraje klíčovou roli v regulaci aktivace T-buněk. Tím, že soutěží se stimulačním receptorem CD28 o vazbu na molekuly B7 (CD80 a CD86) na buňkách prezentujících antigen, CTLA4 potlačuje imunitní reakce, čímž udržuje autotoleranci a zabraňuje autoimunitě. CTLA4 je klíčovým cílem v imunoterapii rakoviny, zejména u léků jako ipilimumab, které mají za cíl posílit protinádorovou imunitu blokováním tohoto kontrolního bodu a aktivací T buněk.
Exprese CTLA4 v této buněčné linii byla potvrzena pomocí průtokové cytometrie s protilátkou specifickou pro cíl, což zajistilo spolehlivou a konzistentní hustotu receptorů v celé buněčné populaci.
- Tkáň
- Fetální ledvina
- Nemoc
- Transformované/imortalizované; netumorogenní (na pozadí HEK293)
- Aplikace
- Výzkum inhibitorů kontrolních bodů; vývoj protilátek zaměřených na CTLA-4 (ipilimumab, analogy tremelimumabu); testy kostimulace T-buněk; screening v oblasti imunoonkologie; vývoj bispecifických protilátek
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Žena
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- GMO-S1
- Podrobnosti o statusu GMO
- GMO-S1: This HEK293 variant contains a CTLA-4 expression construct for immune checkpoint research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelu podobné
- Typ buňky
- Epitelové buňky
- Doba zdvojnásobení
- cca 24–36 hodin
04Identifikátory
- Citace
- HEK293-CTLA4 (katalogové číslo Cytion 305423)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G20
05Exprese a náchylnost
- Exprimované receptory
- CTLA4 (CD152)
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Médium doplňte 10% FBS, 1 mM pyruvátem sodným, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Přidejte geneticin (G418-Sulfat), abyste dosáhli konečné koncentrace 1 mg/ml.
- Disociační činidlo
- Trypsin-EDTA
- Subkultivace
- Pro běžné kultivace adherentních buněk: Z adherentních buněk odsaďte staré kultivační médium a promyjte je PBS, abyste odstranili veškeré zbývající médium. Po odsátí PBS přidejte odpovídající objem roztoku trypsinu/EDTA podle velikosti kultivační nádoby (např. 1 ml pro baňku T25, 3 ml pro baňku T75) a inkubujte při pokojové teplotě nebo 37 °C, dokud se buňky neoddělí (5-10 minut). Oddělování sledujte pod mikroskopem a v případě potřeby jemně poklepejte na nádobu, aby se buňky uvolnily. Po oddělení přidejte kompletní médium k inaktivaci trypsinu/EDTA, jemně resuspendujte buňky a alikvotní část buněčné suspenze přeneste do nové kultivační nádoby obsahující čerstvé médium. Umístěte nádobu do inkubátoru nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a každé 2 až 3 dny vyměňte médium.
- Poměr rozdělení
- 1 až 5
- Hustota výsevu
- 2 až 4 x 104 buněk/cm2
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení rozdělte buňky v poměru 1:2 až 1:3 do baněk T25 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazování a adherovat (v případě adherujících kultur).
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- Plod
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Prohlášení o vyloučení odpovědnosti
- Naše buňky jsou poskytovány výhradně pro účely laboratorního výzkumu in vitro a nejsou určeny pro klinické nebo diagnostické použití, ani nejsou určeny k podávání lidem nebo použití pro veterinární účely. Uživatelé musí dodržovat všechny platné pokyny a předpisy pro zacházení s těmito buňkami a jejich použití ve výzkumném prostředí.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Platí smlouvy s třetími stranami
- Ano


.jpg)