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Hep 3B2.1-7
Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare infantile
Sinonimi
Hep 3B2_1-7, HEP3B217, Hep 3B2, HEP-3B2, HEP3B2, Hep-3B, HEP-3B, Hep 3B, Hep3B, HEP3B

Documenti

Hep 3B2.1-7

Cell line · Codice prodotto 305141

The Hep3B cell line, derived from an 8-year-old child with liver cancer, is a pivotal model in the study of human liver cancer cells and their responses t...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare Hep3B, derivata da un bambino di 8 anni affetto da cancro al fegato, è un modello fondamentale per lo studio delle cellule tumorali epatiche umane e della loro risposta a vari agenti terapeutici. Le cellule Hep3B contengono un genoma integrato del virus dell'epatite B e sono parte integrante dello studio delle risposte differenziate ai farmaci grazie alle loro caratteristiche genetiche e fenotipiche uniche.

La linea cellulare di epatoma umano Hep 3B è nota per la sua ampia espressione di proteine specifiche del fegato, come l'alfa-fetoproteina (AFP), l'albumina e vari altri marcatori, che la rendono uno strumento prezioso negli studi sul metabolismo dei farmaci e sull'epatotossicità. Questa ampia gamma di proteine espresse consente una valutazione completa delle modalità di interazione e metabolizzazione degli agenti terapeutici da parte delle cellule tumorali del fegato.

La linea cellulare Hep 3B e le linee cellulari derivate consentono di seguire la crescita e la metastasi del tumore in vivo, facilitando lo studio della progressione del cancro al fegato e l'efficacia di potenziali trattamenti.

La linea cellulare Hep3B si distingue come una risorsa cruciale per far progredire la nostra comprensione della biologia del cancro al fegato e lo sviluppo di strategie terapeutiche più efficaci.

Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare infantile
Sinonimi
  • Hep 3B2_1-7
  • HEP3B217
  • Hep 3B2
  • HEP-3B2
  • HEP3B2
  • Hep-3B
  • HEP-3B
  • Hep 3B
  • Hep3B
  • HEP3B

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Hep 3B2.1-7 (catalogo Cytion numero 305141)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0326

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Alfa fetoproteina (alfa-fetoproteina), antigene di superficie dell'epatite B (Hbsag), albumina, alfa2 macroglobulina (alfa-2-macroglobulina), alfa1 antitripsina (alfa-1-antitripsina), transferrina, alfa1 antimotripsina (alfa-1-antitripsina), aptolglobina, cerulopl

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
8 anni
Etnia
Africano