Pāriet uz saturu
Daudi
Audums
Asinis
Slimība
Burkita limfoma
Sinonīmi
DAUDI, NK-10A, NK-10a, NK 10a, NK10a, N, GM03190, GM3190, GM03190A, GM17346

Dokumenti

Daudi

Cell line · Preces numurs 302009

The Daudi cell line was established in 1967 from a 16-year-old African boy diagnosed with Burkitt's Lymphoma, a type of lymphoma. Named after the patient ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Daudi šūnu līnija tika izveidota 1967. gadā no 16 gadus veca Āfrikas zēna, kuram diagnosticēja Burkita limfomu, kas ir limfomas veids. Daudi šūnu līnijai, kas nosaukta pacienta, no kura tā tika iegūta, vārdā, ir raksturīgs Epšteina-Barra vīrusa (EBV) pozitīvisms, kas ir kopīga Burkita limfomas un vairāku citu limfoproliferatīvo slimību pazīme. EBV infekcija šajās šūnās ir unikāls modelis, lai pētītu vīrusa lomu audzēju veidošanās procesā, jo īpaši saistībā ar B šūnu ļaundabīgajiem audzējiem.

Daudi cilvēka šūnām uz to virsmas nav klasiskā galvenā histokompatibilitātes kompleksa (MHC) I klases molekulu ekspresijas, ko skaidro ar to, ka tajās nav beta-2-mikroglobulīna, kas ir būtisks komponents, kurš atbild par pareizu MHC I klases molekulas salocīšanu un apstrādi endoplazmatiskajā retikulā. Beta-2-mikroglobulīna trūkums Daudi šūnu līnijā izraisa glikozīlu modifikāciju trūkumu, kas nepieciešamas šo molekulu pareizai ekspresijai uz šūnu virsmas.

Daudi šūnu līniju plaši izmanto imunoloģiskajos pētījumos, jo īpaši pētījumos, kas saistīti ar limfocītu subpopulāciju, tostarp limfocītu, dabīgo killeršūnu un perifēro asiņu mononukleāro šūnu, imūndepleciju.

Kopumā Daudi šūnu līnija kalpo kā būtisks resurss, lai papildinātu mūsu zināšanas dažādās pētniecības jomās, sākot ar šūnu bioloģijas pamatizpratni un beidzot ar mērķterapiju izstrādi vēža ārstēšanai.

Audums
Asinis
Slimība
Burkita limfoma
Pieteikumi
B šūnu virsmas antigēnu analīze, citotoksisko zāļu testēšana, mutāciju analīze, apoptozes mehānismu analīze, testu izstrāde.
Sinonīmi
  • DAUDI
  • NK-10A
  • NK-10a
  • NK 10a
  • NK10a
  • N
  • GM03190
  • GM3190
  • GM03190A
  • GM17346

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Apaļas šūnas
Šūnu tips
B limfoblasts
Kariotips
46, gandrīz diploīds

04Identifikatori

Atsauce
Daudi (Cytion kataloga numurs 302009)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0008

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
CD10+, CD19+, CD20+, CD21+, CD22+, CD23-, CD24-, CD32+, CD37+, CD38+, CD39-, CD40+, CD54+, CD72+, CD73-, CD75+, CD77+, CD81+, CD82+, CD83-, CD84+, CD86+

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Sēšanas blīvums
3 x 105 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Ātri (48 stundas)
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
16 gadi
Etniskā piederība
Āfrikas