Pāriet uz saturu
Human Mesenchymal Stem Cells, Endometrium
Audums
Endometrijs

Dokumenti

Human Mesenchymal Stem Cells, Endometrium

Cell line · Preces numurs 300647

Human Mesenchymal Stem Cells, Endometrium (eMSCs), are a distinct subset of MSCs derived from the regenerative endometrial tissue of the uterus. The endom...

€690.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Neliels krājums
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Cilvēka mezenhimālās cilmes šūnas, endometrija (eMSC), ir atšķirīga MSC apakšgrupa, kas iegūta no dzemdes reģeneratīvā endometrija auda. Endometrija dabiskais augšanas, diferenciācijas un atdalīšanās cikls uzsver šo šūnu reģeneratīvās spējas, padarot eMSC īpaši vērtīgas pētījumos par audu atjaunošanu, reģeneratīvo medicīnu un ginekoloģijas pētījumos. To unikālā izcelsme arī veicina to potenciālu imūnsistēmas traucējumu un iekaisuma stāvokļu pētījumos, ņemot vērā to ievērojamas imūnmodulējošās īpašības.

Šīs eMSC saglabā MSC raksturīgo daudzpotences īpašību, ar pierādītām spējām diferenciēties adipocītos, osteoblastos un hondrocītos kontrolētos in vitro apstākļos, izmantojot specifiskus diferenciācijas barotnes. Šī diferenciācijas spēja, kopā ar to izcelsmi, padara eMSC īpaši nozīmīgas pētījumos, kas saistīti ar audu inženieriju un reģeneratīvo terapiju. Mūsu eMSC tiek kriokonservētas agrīnā stadijā, lai nodrošinātu maksimālu dzīvotspēju un funkcionalitāti pēc atkausēšanas, katrā kriovialā ir 1 x 106 šūnas ar dzīvotspējas rādītāju no 92% līdz 95%, kas apstiprināts ar Trypan Blue krāsvielas izslēgšanas testu. Šūnas ir iegūtas no veselīgiem donoriem, kuri devuši informētu piekrišanu, un katra partija tiek pakļauta visaptverošai kvalitātes kontrolei, lai pārbaudītu šūnu identifikāciju, tīrību, iedarbīgumu, dzīvotspēju un piemērotību in vitro pētniecības lietojumiem, nodrošinot augstāko kvalitāti zinātniskajiem pētījumiem.

Audums
Endometrijs
Pieteikumi
Zāļu testēšana, reģeneratīvā medicīna, slimību izpēte

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Labi izkliedēta vārpstas formas, fibroblastiem līdzīga morfoloģija vismaz 5 pasāžu laikā. Mazāk nekā 2 % šūnu katrā pasāžā uzrāda spontānu miofibroblastiem līdzīgu morfoloģiju.
Šūnu tips
Cilmes šūnas

04Identifikatori

Atsauce
Cilvēka mezenhimālās cilmes šūnas, endometrijs (Cytion kataloga numurs 300647)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Lai identificētu kultivētās MSC (P2-P3) pirms kriokonservēšanas, plūsmas citometrijas analīzē izmanto plašu marķieru paneli, tostarp CD73/CD90/CD105 (pozitīvi) un CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negatīvi). Šos marķierus iesaka ISCT MSC komiteja.
Vīrusi
Donors ir negatīvs uz HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) un HIV-1/2 (IFA). Šūnas ir negatīvas uz HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum un Ureaplasma parvum.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w/o: Ribonukleozīdi, w/o: Deoksiribonukleozīdi, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, 2 ng/ml bFGF
Disociācijas reaģents
Tripsīns-EDTA
Pārstādīšana
Parastai adherentu šūnu kultūrai: Lai noņemtu atlikušo barotni, aspirējiet veco barotni no pielipušajām šūnām un izskalojiet tās ar PBS, lai noņemtu atlikušo barotni. Pēc PBS atsūknēšanas pievienojiet atbilstošu tripsīna/EDTA šķīduma tilpumu atkarībā no kultūras trauka lieluma (piemēram, 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai) un inkubējiet istabas temperatūrā vai 37 °C, līdz šūnas atdalās (5-10 minūtes). Novērot atdalīšanos ar mikroskopu un, ja nepieciešams, viegli piesitiet trauku, lai atbrīvotu šūnas. Pēc atdalīšanās pievienot pilnu barotni, lai inaktivētu tripsīnu/EDTA, uzmanīgi resuspendēt šūnas un šūnu suspensijas alikvotu pārvietot jaunā barotnē ar svaigu barotni. Ievietot trauku inkubatorā, kas iestatīts 37 °C temperatūrā ar 5 %CO2, un ik pēc 2-3 dienām mainīt barotni.
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
Pirmā šķidruma atjaunošana pēc 24 stundām, pēc tam ik pēc 2 līdz 3 dienām.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā krioprezervēšanas barotni mēs izmantojam 80 % FBS + 10 % bāzes barotni + 10 % DMSO, lai saglabātu dzīvotspēju, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas nodrošina labāku krioprotekciju, novēršot nevēlamu diferenciāciju, vienlaikus saglabājot pluripotenci.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Lūdzu, jautājiet
Etniskā piederība
Kaukāzietis