Ga naar de inhoud
H9 (derivative of HuT 78)
Weefsel
Bloed
Ziekte
Sezary-syndroom (agressieve vorm van cutaan T-cellymfoom)
Plaats van uitzaaiingen
Perifeer bloed
Synoniemen
HT clone H9, HT(H9), H 9, H-9

Documenten

H9 (derivative of HuT 78)

Cell line · Productnummer 300460

The H9 cell line, derived from a clonal derivative of the HUT 78 T-cell line from an adult patient with Sezary syndrome, exhibits specific clinical charac...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De H9-cellijn, afgeleid van een klonale afgeleide van de HUT 78 T-cellijn van een volwassen patiënt met het Sezary-syndroom, vertoont specifieke klinische kenmerken waardoor deze zeer relevant is voor HIV-onderzoek. Het is met name permissief voor HIV-1 replicatie, waardoor de isolatie en vermeerdering van HIV-1 uit het bloed van patiënten met AIDS en pre-AIDS aandoeningen wordt vergemakkelijkt. Deze eigenschap onderstreept het nut ervan voor het bestuderen van viraal gedrag en het testen van antivirale strategieën in verschillende klinische scenario's.

Karyotypisch is H9 bijna triploïd met een modaal chromosoomnummer van 69, variërend van 58 tot 74, en vertoont een frequentie van 2,5% hogere ploïdieën. De cellijn vertoont een extreem complex karyotype, waarbij bijna 60% van de chromosomen per cel bestaat uit structureel veranderde markerchromosomen, waaronder translocaties zoals t(3p4q), t(5q6q), t(5p6p) en deleties zoals del(7)(q32). Dergelijke chromosomale afwijkingen dragen bij tot het unieke genetische profiel van de lijn en beïnvloeden het gedrag en de respons op virale infecties. De afwezigheid van de normale chromosomen N4, N5, N6, N7, N10, N13, N18, N19, N20 en X maakt de genetische samenstelling nog duidelijker.

Bovendien is de H9-cellijn tumorigeen van aard, wat wordt aangetoond door succesvolle subcutane tumorvorming in naakte muizen na inoculatie met 10(7) cellen. De lijn brengt een reeks antigenen tot expressie, waaronder CD4 en verschillende humane leukocytenantigenen (HLA) zoals A1, B62, C3, DR4 en DQ3, die een cruciale rol spelen in de immuunherkenning en -respons. Zijn gevoeligheid voor HIV-1 en expressie van genen zoals interleukine-2 (IL-2) zijn cruciaal voor het onderzoeken van immuunreacties en virale interacties, waardoor H9 een vitaal instrument is in het landschap van immunologisch en virologisch onderzoek.

Weefsel
Bloed
Ziekte
Sezary-syndroom (agressieve vorm van cutaan T-cellymfoom)
Plaats van uitzaaiingen
Perifeer bloed
Synoniemen
  • HT clone H9
  • HT(H9)
  • H 9
  • H-9

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Lymfoblast
Celtype
T-cel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
H9 (afgeleide van HuT 78) (Cytion-catalogusnummer 300460)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1240

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
CD4+
Eiwit-expressie
Interleukine 2 (IL-2)
Iso-enzymen
AK-1, 0, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 1, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 0
Gevoeligheid voor virussen
HIV-1 (HTLV-III)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Heruitplanten
Homogeniseer de celsuspensie in de kolf voorzichtig door op en neer te pipetteren en neem vervolgens een representatief monster om de celdichtheid per ml te bepalen. Verdun de suspensie tot een celconcentratie van 1 x 105 cellen/ml met vers kweekmedium en verdeel de aangepaste suspensie in nieuwe kolven voor verdere kweek.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
53 jaar
Etnische afkomst
Europese