Mine otse sisu juurde
H9 (derivative of HuT 78)
Kude
Veri
Haigus
Sezary sündroom (T-rakkude lümfoomi agressiivne vorm)
Metastaaside asukoht
Perifeerne veri
Sünonüümid
HT clone H9, HT(H9), H 9, H-9

Dokumendid

H9 (derivative of HuT 78)

Cell line · Toote number 300460

The H9 cell line, derived from a clonal derivative of the HUT 78 T-cell line from an adult patient with Sezary syndrome, exhibits specific clinical charac...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

H9 rakuliinil, mis on saadud Sezary sündroomiga täiskasvanud patsiendi HUT 78 T-rakkude liini klonaalsest derivaadist, on spetsiifilised kliinilised omadused, mis muudavad selle väga oluliseks HIV-uuringutes. See on HIV-1 replikatsioonile eriti soodne, hõlbustades HIV-1 isoleerimist ja paljundamist AIDS-i ja AIDS-i eelsete seisunditega patsientide verest. See omadus rõhutab selle kasulikkust viiruse käitumise uurimisel ja viirusevastaste strateegiate testimisel erinevates kliinilistes stsenaariumides.

Karyotüübiliselt on H9 peaaegu triploidne, modaalse kromosoomiarvuga 69, mis ulatub 58-st kuni 74-ni, ning 2,5% ulatuses esineb kõrgema ploidsusega kromosoomiarvu. Rakuliinil on äärmiselt keeruline karyotüüp, kusjuures peaaegu 60% kromosoomidest raku kohta koosneb struktuuriliselt muutunud markerkromosoomidest, sealhulgas translokatsioonidest, nagu t(3p4q), t(5q6q), t(5p6p), ja deletsioonidest, nagu del(7)(q32). Sellised kromosoomianomaaliad aitavad kaasa liini unikaalsele geneetilisele profiilile, mõjutades selle käitumist ja reaktsiooni viirusinfektsioonidele. Normaalsete kromosoomide N4, N5, N6, N7, N10, N13, N18, N19, N20 ja X puudumine eristab selle geneetilist struktuuri veelgi.

Lisaks sellele on rakuliin H9 oma olemuselt tumorigeenne, mida näitas 10(7) rakkude inokuleerimisel edukas nahaalune kasvajate moodustumine alasti hiirtel. See ekspresseerib mitmeid antigeene, sealhulgas CD4 ja mitmesuguseid inimese leukotsüütide antigeene (HLA), nagu A1, B62, C3, DR4 ja DQ3, mis mängivad olulist rolli immuunsüsteemi äratundmises ja vastuses. Tema vastuvõtlikkus HIV-1 suhtes ja selliste geenide nagu interleukiin-2 (IL-2) ekspressioon on immuunvastuse ja viirusliku interaktsiooni uurimisel keskse tähtsusega, mistõttu on H9 oluline vahend immunoloogiliste ja viroloogiliste uuringute maastikul.

Kude
Veri
Haigus
Sezary sündroom (T-rakkude lümfoomi agressiivne vorm)
Metastaaside asukoht
Perifeerne veri
Sünonüümid
  • HT clone H9
  • HT(H9)
  • H 9
  • H-9

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastid
Rakutüüp
T-rakk

04Tunnused

Viide
H9 (HuT 78 derivaat) (Cytion katalooginumber 300460)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1240

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
CD4+
Valgu ekspressioon
Interleukiin 2 (IL-2)
Isoensüümid
AK-1, 0, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 1, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 0
Viirusele vastuvõtlikkus
HIV-1 (HTLV-III)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Homogeniseerige kolvis olev rakususpensioon õrnalt pipeteerides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kultuurikeskkonnaga, et saavutada rakkude kontsentratsioon 1 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
53 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa