H9 (derivative of HuT 78)

La línea celular H9, derivada de un clon de la línea de células T HUT 78 procedente de un paciente adulto con síndrome de Sezary, presenta características clínicas específicas que la hacen sumamente relevante para la investigación sobre el VIH. Es notablemente permisiva para la replicación del VIH-1, lo que facilita el aislamiento y la propagación del VIH-1 a partir de la sangre de pacientes con SIDA y en etapas previas al SIDA. Esta característica resalta su utilidad para estudiar el comportamiento viral y evaluar estrategias antivirales en diversos escenarios clínicos.

Desde el punto de vista cariotípico, la línea H9 es casi triploide, con un número modal de cromosomas de 69, que oscila entre 58 y 74, y presenta una frecuencia del 2,5 % de ploidías superiores. La línea celular presenta un cariotipo extremadamente complejo, en el que casi el 60 % de los cromosomas por célula consisten en cromosomas marcadores estructuralmente alterados, incluyendo translocaciones como t(3p4q), t(5q6q), t(5p6p) y deleciones como del(7)(q32). Dichas anomalías cromosómicas contribuyen al perfil genético único de la línea, lo que influye en su comportamiento y en su respuesta a las infecciones virales. La ausencia de los cromosomas normales N4, N5, N6, N7, N10, N13, N18, N19, N20 y X distingue aún más su composición genética.

Además, la línea celular H9 es de naturaleza tumorigénica, lo cual se demuestra por la formación exitosa de tumores subcutáneos en ratones desnudos cuando se les inoculan 10⁷ células. Expresa una variedad de antígenos, entre ellos el CD4 y diversos antígenos leucocitarios humanos (HLA) como A1, B62, C3, DR4 y DQ3, que desempeñan un papel fundamental en el reconocimiento y la respuesta inmunitaria. Su susceptibilidad al VIH-1 y la expresión de genes como la interleucina-2 (IL-2) son fundamentales para investigar las respuestas inmunitarias y las interacciones virales, lo que convierte a la línea H9 en una herramienta vital en el ámbito de la investigación inmunológica y virológica.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.