Przejdź do treści
H9 (derivative of HuT 78)
Chusteczka
Krew
Choroba
Zespół Sezary'ego (agresywna postać chłoniaka skórnego z komórek T)
Miejsce przerzutów
Krew obwodowa
Synonimy
HT clone H9, HT(H9), H 9, H-9

Dokumenty

H9 (derivative of HuT 78)

Cell line · Numer produktu 300460

The H9 cell line, derived from a clonal derivative of the HUT 78 T-cell line from an adult patient with Sezary syndrome, exhibits specific clinical charac...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa H9, pochodząca z klonalnej pochodnej linii komórek T HUT 78 od dorosłego pacjenta z zespołem Sezary'ego, wykazuje specyficzne cechy kliniczne, co czyni ją wysoce istotną w badaniach nad HIV. Jest ona szczególnie permisywna dla replikacji HIV-1, ułatwiając izolację i namnażanie HIV-1 z krwi pacjentów z AIDS i stanami przed AIDS. Ta cecha podkreśla jego przydatność w badaniu zachowań wirusowych i testowaniu strategii przeciwwirusowych w różnych scenariuszach klinicznych.

Kariotypowo, H9 jest prawie triploidalny z modalną liczbą chromosomów 69, w zakresie od 58 do 74, i wykazuje 2,5% częstotliwość wyższych ploidii. Linia komórkowa wykazuje niezwykle złożony kariotyp, z prawie 60% chromosomów na komórkę składających się ze strukturalnie zmienionych chromosomów markerowych, w tym translokacji, takich jak t(3p4q), t(5q6q), t(5p6p) i delecji, takich jak del(7)(q32). Takie nieprawidłowości chromosomalne przyczyniają się do unikalnego profilu genetycznego linii, wpływając na jej zachowanie i odpowiedź na infekcje wirusowe. Brak prawidłowych chromosomów N4, N5, N6, N7, N10, N13, N18, N19, N20 i X dodatkowo wyróżnia jej skład genetyczny.

Co więcej, linia komórkowa H9 ma charakter nowotworowy, co wykazano poprzez skuteczne tworzenie guza podskórnego u nagich myszy po zaszczepieniu 10(7) komórek. Wykazuje ekspresję szeregu antygenów, w tym CD4 i różnych ludzkich antygenów leukocytarnych (HLA), takich jak A1, B62, C3, DR4 i DQ3, które odgrywają kluczową rolę w rozpoznawaniu i odpowiedzi immunologicznej. Jego podatność na HIV-1 i ekspresja genów, takich jak interleukina-2 (IL-2), są kluczowe dla badania odpowiedzi immunologicznej i interakcji wirusowych, dzięki czemu H9 jest istotnym narzędziem w krajobrazie badań immunologicznych i wirusologicznych.

Chusteczka
Krew
Choroba
Zespół Sezary'ego (agresywna postać chłoniaka skórnego z komórek T)
Miejsce przerzutów
Krew obwodowa
Synonimy
  • HT clone H9
  • HT(H9)
  • H 9
  • H-9

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Limfoblast
Typ komórki
Komórka T

04Identyfikatory

Źródło
H9 (pochodna szczepu HuT 78) (numer katalogowy Cytion 300460)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1240

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
CD4+
Ekspresja białek
Interleukina 2 (IL-2)
Izoenzymy
AK-1, 0, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 1, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 0
Podatność na wirusy
HIV-1 (HTLV-III)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Delikatnie homogenizować zawiesinę komórek w kolbie, pipetując w górę i w dół, a następnie pobrać reprezentatywną próbkę w celu określenia gęstości komórek na ml. Rozcieńczyć zawiesinę świeżym podłożem hodowlanym, aby uzyskać stężenie komórek wynoszące 1 x 105 komórek/ml, a następnie podzielić dostosowaną zawiesinę na porcje w nowych kolbach w celu dalszej hodowli.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
53 lata
Pochodzenie etniczne
Europejski