Ga naar de inhoud
MSTO-211H
Weefsel
Long
Ziekte
Pleuraal mesothelioom
Synoniemen
MSTO-211 H, MSTO211H, MSTO-211, 211H, MeSoTheliOma-211H

Documenten

MSTO-211H

Cell line · Productnummer 300450

The MSTO-211H cell line is derived from a patient with biphasic mesothelioma, specifically from a pleural effusion. It is classified as metastatic, and th...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De MSTO-211H cellijn is afkomstig van een patiënt met bifasisch mesothelioom, specifiek van een pleurale effusie. Het is geclassificeerd als uitgezaaid en de patiënt had geen eerdere bestralings- of chemotherapiebehandelingen ondergaan voordat de cellijn werd gemaakt. MSTO-211H cellen zijn opmerkelijk omdat ze verschillende markers tot expressie brengen die belangrijk zijn voor het begrijpen van zowel hun biologisch gedrag als hun potentiële nut in kankeronderzoek. Deze cellen hebben bindingsplaatsen met een hoge affiniteit voor epidermale groeifactor (EGF), een eigenschap die kan bijdragen aan hun proliferatieve capaciteiten, aangezien EGF een belangrijke regulator van celgroei en differentiatie is. De aanwezigheid van EGF-receptoren suggereert dat deze cellen nuttig kunnen zijn bij het bestuderen van pathways gerelateerd aan groeifactorsignalering bij kanker.

Naast EGF-receptoren brengen MSTO-211H cellen neuron-specifieke enolase (NSE) tot expressie, een enzym dat typisch voorkomt in neuronen en neuro-endocriene cellen. De expressie van NSE in MSTO-211H cellen kan duiden op een neuro-endocriene differentiatie, een kenmerk dat belangrijk kan zijn voor het begrijpen van de heterogeniteit van mesothelioom tumoren. Verder brengen de cellen zowel de alfa- als de bèta-subeenheid van humaan choriongonadotrofine (HCG) tot expressie, een hormoon dat gewoonlijk tijdens de zwangerschap wordt geproduceerd maar waarvan ook bekend is dat het door bepaalde kankers wordt uitgescheiden. De expressie van HCG subeenheden in MSTO-211H cellen suggereert een mogelijke rol in tumorbiologie, mogelijk gerelateerd aan immuunontwijking of tumorprogressiemechanismen. Deze markers benadrukken gezamenlijk de complexe aard van deze cellijn, waardoor het een waardevol model is voor het onderzoeken van mesothelioombiologie en de effecten van therapeutische middelen.

Weefsel
Long
Ziekte
Pleuraal mesothelioom
Synoniemen
  • MSTO-211 H
  • MSTO211H
  • MSTO-211
  • 211H
  • MeSoTheliOma-211H

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Tumorverwekkend
Ja, tumoren voor med in ongeveer 20% van de naakte muizen geïnoculeerd met MSTO-211H-cellen
Karyotype
Modaal getal = 72, bereik = 70 tot 78
Verdubbelingstijd
20 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MSTO-211H (Cytion catalogusnummer 300450)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1430

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Bindingsplaatsen met hoge affiniteit voor EGF, expressie van neuronspecifieke enolase (NSE) en alfa- en bèta-subeenheden van HCG, L-DOPA decarboxylase (DDC), bombesine en neurotensine werden niet gedetecteerd.

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
De cellen kunnen een verzadigingsdichtheid van 400.000 cellen per cm2 bereiken, maar zullen van het oppervlak afvallen wanneer ze deze dichtheid bereiken. Verwijder medium en spoel de aanhangende cellen met PBS zonder calcium en magnesium (3-5 ml PBS voor T25, 5-10ml voor T75 celkweekflessen). Voeg Accutase toe (1-2ml per T25, 2,5ml per T75 celkweekfles), het celblad moet volledig bedekt zijn. Incubeer 8-10 minuten bij omgevingstemperatuur. Resuspendeer de cellen voorzichtig met medium (10 ml), centrifugeer 5 minuten bij 300xg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven met vers medium.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
62 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch