
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Pleuraalinen mesoteliooma
- Synonyymit
- MSTO-211 H, MSTO211H, MSTO-211, 211H, MeSoTheliOma-211H
Asiakirjat
MSTO-211H
Cell line · Tuotenumero 300450
The MSTO-211H cell line is derived from a patient with biphasic mesothelioma, specifically from a pleural effusion. It is classified as metastatic, and th...
Räätälöinti / Suositukset
- MSTO-211HCell line€430.00
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
MSTO-211H-solulinja on peräisin potilaalta, jolla on kaksivaiheinen mesoteliooma, erityisesti keuhkopussin effuusiosta. Se on luokiteltu etäpesäkkeiseksi, eikä potilaalle ollut annettu aiempia säteily- tai solunsalpaajahoitoja ennen solulinjan perustamista. MSTO-211H-solut ilmentävät useita merkkiaineita, joilla on merkitystä sekä niiden biologisen käyttäytymisen että niiden mahdollisen hyödyn ymmärtämisessä syöpätutkimuksessa. Näillä soluilla on korkeaaffiniteettiset sitoutumiskohdat epidermiselle kasvutekijälle (EGF), mikä saattaa vaikuttaa niiden proliferatiiviseen kykyyn, sillä EGF on keskeinen solujen kasvun ja erilaistumisen säätelijä. EGF-reseptorien esiintyminen viittaa siihen, että nämä solut voisivat olla hyödyllisiä tutkittaessa syöpään liittyviä kasvutekijöiden signalointiin liittyviä reittejä.
EGF-reseptorien lisäksi MSTO-211H-solut ilmentävät neuronispesifistä enolaasia (NSE), entsyymiä, jota esiintyy tyypillisesti neuroneissa ja neuroendokriinisissä soluissa. NSE:n ilmentyminen MSTO-211H-soluissa voi viitata neuroendokriiniseen erilaistumispotentiaaliin, mikä voi olla merkittävä ominaisuus mesotelioomakasvainten heterogeenisuuden ymmärtämisessä. Lisäksi solut ilmentävät sekä ihmisen koriongonadotropiinin (HCG) alfa- että beeta-alayksiköitä. HCG on hormoni, jota tyypillisesti tuotetaan raskauden aikana, mutta jonka tiedetään erittyvän myös tietyistä syövistä. HCG:n alayksiköiden ilmentyminen MSTO-211H-soluissa viittaa mahdolliseen rooliin kasvaimen biologiassa, joka saattaa liittyä immuunipuolustukseen tai kasvaimen etenemismekanismeihin. Nämä merkkiaineet korostavat yhdessä tämän solulinjan monimutkaista luonnetta, mikä tekee siitä arvokkaan mallin mesoteliooman biologian ja terapeuttisten aineiden vaikutusten tutkimiseen.
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Pleuraalinen mesoteliooma
- Synonyymit
- MSTO-211 H
- MSTO211H
- MSTO-211
- 211H
- MeSoTheliOma-211H
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, noin 20 prosentilla nude-hiiristä, joihin on istutettu MSTO-211H-soluja, on med-kasvaimia
- Karyotyyppi
- Modaaliluku = 72, vaihteluväli = 70-78
- Kaksinkertaistumisaika
- 20 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- MSTO-211H (Cytionin luettelonumero 300450)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1430
05Ilmentyminen ja alttius
- Proteiinin ilmentyminen
- Korkean affiniteetin sitoutumiskohtia EGF:lle, neuronispesifisen enolaasin (NSE) ja HCG:n alfa- ja beeta-alayksiköiden, L-DOPA-dekarboksylaasin (DDC), bombesiinin ja neurotensiinin ilmentymistä ei havaittu.
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Solut voivat saavuttaa kyllästymistiheyden 400 000 solua cm2 kohti, mutta ne irtoavat pinnalta, kun ne saavuttavat tämän tiheyden. Poistetaan väliaine ja huuhdellaan tarttuneet solut PBS:llä, jossa ei ole kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml PBS:ää T25-soluviljelypulloissa, 5-10 ml T75-soluviljelypulloissa). Lisää Accutase (1-2 ml T25-soluviljelypulloa kohti, 2,5 ml T75-soluviljelypulloa kohti), solulevyn on peitettävä kokonaan. Inkuboidaan huoneenlämmössä 8-10 minuuttia. Resuspensioi solut varovasti väliaineella (10 ml), sentrifugoi 5 minuuttia 300xg:n kierrosluvulla, resuspensioi solut tuoreeseen väliaineeseen ja annostele ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 1 x 104 solua/cm2
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 62 vuotta
- Etnisyys
- Kaukasialainen
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä