Przejdź do treści
MSTO-211H
Chusteczka
Płuco
Choroba
Międzybłoniak opłucnej
Synonimy
MSTO-211 H, MSTO211H, MSTO-211, 211H, MeSoTheliOma-211H

Dokumenty

MSTO-211H

Cell line · Numer produktu 300450

The MSTO-211H cell line is derived from a patient with biphasic mesothelioma, specifically from a pleural effusion. It is classified as metastatic, and th...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa MSTO-211H pochodzi od pacjenta z międzybłoniakiem dwufazowym, w szczególności z wysięku opłucnowego. Został on sklasyfikowany jako przerzutowy, a pacjent nie został poddany wcześniejszej radioterapii ani chemioterapii przed utworzeniem linii komórkowej. Komórki MSTO-211H wyróżniają się ekspresją kilku markerów, które są istotne dla zrozumienia zarówno ich biologicznego zachowania, jak i potencjalnej użyteczności w badaniach nad rakiem. Komórki te posiadają miejsca wiązania o wysokim powinowactwie dla naskórkowego czynnika wzrostu (EGF), co może przyczyniać się do ich zdolności proliferacyjnych, ponieważ EGF jest kluczowym regulatorem wzrostu i różnicowania komórek. Obecność receptorów EGF sugeruje, że komórki te mogą być przydatne w badaniu szlaków związanych z sygnalizacją czynnika wzrostu w nowotworach.

Oprócz receptorów EGF, komórki MSTO-211H wyrażają enolazę specyficzną dla neuronów (NSE), enzym zwykle występujący w neuronach i komórkach neuroendokrynnych. Ekspresja NSE w komórkach MSTO-211H może wskazywać na potencjał różnicowania neuroendokrynnego, co może być istotne dla zrozumienia heterogeniczności guzów międzybłoniaka. Co więcej, komórki wykazują ekspresję zarówno podjednostek alfa, jak i beta ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej (HCG), hormonu zwykle wytwarzanego podczas ciąży, ale również wydzielanego przez niektóre nowotwory. Ekspresja podjednostek HCG w komórkach MSTO-211H sugeruje możliwą rolę w biologii guza, potencjalnie związaną z mechanizmami unikania odporności lub progresji guza. Markery te wspólnie podkreślają złożoną naturę tej linii komórkowej, czyniąc ją cennym modelem do badania biologii międzybłoniaka i działania środków terapeutycznych.

Chusteczka
Płuco
Choroba
Międzybłoniak opłucnej
Synonimy
  • MSTO-211 H
  • MSTO211H
  • MSTO-211
  • 211H
  • MeSoTheliOma-211H

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Nowotworotwórczy
Tak, guzy med u około 20% nagich myszy zaszczepionych komórkami MSTO-211H
Karyotyp
Liczba modalna = 72, zakres = 70 do 78
Czas podwojenia
20 godzin

04Identyfikatory

Źródło
MSTO-211H (numer katalogowy Cytion 300450)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1430

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Nie wykryto miejsc wiązania o wysokim powinowactwie dla EGF, ekspresji enolazy specyficznej dla neuronów (NSE) oraz podjednostek alfa i beta HCG, dekarboksylazy L-DOPA (DDC), bombesiny i neurotensyny.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Komórki mogą osiągnąć gęstość nasycenia wynoszącą 400 000 komórek na cm2, ale po osiągnięciu tej gęstości złuszczają się z powierzchni. Usunąć pożywkę i przepłukać przylegające komórki używając PBS bez wapnia i magnezu (3-5 ml PBS dla kolb T25, 5-10 ml dla kolb T75). Dodać Accutase (1-2 ml na kolbę T25, 2,5 ml na kolbę T75), arkusz komórek musi być całkowicie przykryty. Inkubować w temperaturze otoczenia przez 8-10 minut. Ostrożnie ponownie zawiesić komórki w pożywce (10 ml), wirować przez 5 minut z prędkością 300xg, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
62 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski