Přejít na obsah
MSTO-211H
Tkáň
Plíce
Nemoc
Pleurální mezoteliom
Synonyma
MSTO-211 H, MSTO211H, MSTO-211, 211H, MeSoTheliOma-211H

Dokumenty

MSTO-211H

Cell line · Číslo výrobku 300450

The MSTO-211H cell line is derived from a patient with biphasic mesothelioma, specifically from a pleural effusion. It is classified as metastatic, and th...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie MSTO-211H je odvozena od pacienta s bifázickým mezoteliomem, konkrétně z pleurálního výpotku. Je klasifikován jako metastazující a pacient před vytvořením buněčné linie nepodstoupil předchozí ozařování ani chemoterapii. Buňky MSTO-211H se vyznačují expresí několika markerů, které jsou významné pro pochopení jejich biologického chování i jejich potenciálního využití ve výzkumu rakoviny. Tyto buňky mají vysoce afinitní vazebná místa pro epidermální růstový faktor (EGF), což je vlastnost, která může přispívat k jejich proliferačním schopnostem, protože EGF je klíčovým regulátorem buněčného růstu a diferenciace. Přítomnost receptorů EGF naznačuje, že tyto buňky by mohly být užitečné při studiu drah souvisejících se signalizací růstových faktorů u rakoviny.

Kromě receptorů EGF exprimují buňky MSTO-211H neuron-specifickou enolázu (NSE), enzym, který se obvykle vyskytuje v neuronech a neuroendokrinních buňkách. Exprese NSE v buňkách MSTO-211H může svědčit o neuroendokrinním diferenciačním potenciálu, což je vlastnost, která může být významná pro pochopení heterogenity mezoteliomových nádorů. Buňky navíc exprimují alfa i beta podjednotky lidského choriového gonadotropinu (HCG), hormonu, který se obvykle produkuje během těhotenství, ale je také známo, že je vylučován některými druhy rakoviny. Exprese podjednotek HCG v buňkách MSTO-211H naznačuje možnou roli v biologii nádorů, která by mohla souviset s vyhýbáním se imunitě nebo s mechanismy progrese nádoru. Tyto markery společně zdůrazňují komplexní povahu této buněčné linie, což z ní činí cenný model pro zkoumání biologie mezoteliomu a účinků terapeutických látek.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Pleurální mezoteliom
Synonyma
  • MSTO-211 H
  • MSTO211H
  • MSTO-211
  • 211H
  • MeSoTheliOma-211H

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Tumorogenní
Ano, nádory pro med u přibližně 20 % nahých myší inokulovaných buňkami MSTO-211H
Karyotyp
Modální číslo = 72, rozsah = 70 až 78
Doba zdvojnásobení
20 hodin

04Identifikátory

Citace
MSTO-211H (katalogové číslo Cytion 300450)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1430

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Nebyla zjištěna vysoká afinita k EGF, exprese neuron specifické enolázy (NSE) a alfa a beta podjednotek HCG, L-DOPA dekarboxylázy (DDC), bombesinu a neurotensinu.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Buňky mohou dosáhnout hustoty nasycení 400 000 buněk na cm2, ale jakmile této hustoty dosáhnou, odlučují se z povrchu. Odstraňte médium a opláchněte adherované buňky pomocí PBS bez vápníku a hořčíku (3-5 ml PBS pro baňky T25, 5-10 ml pro baňky T75). Přidejte Accutase (1-2 ml na T25, 2,5 ml na baňku s buněčnou kulturou T75), buněčný list musí být zcela pokryt. Inkubujte při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut. Opatrně resuspendujte buňky s médiem (10 ml), centrifugujte 5 minut při 300xg, resuspendujte buňky v čerstvém médiu a rozdělte je do nových baněk, které obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
62 let
Etnická příslušnost
Kavkazský