NCI-H460-celler – Veiledning i lungekreftforskning med innsikt fra NCI-H460

NCI-H460 er humane ikke-småcellede lungekreftceller som ofte brukes i forskning på lungekreft og toksikologi. Denne cellelinjen er et verdifullt verktøy for å studere ulike aspekter av kreftbiologi, blant annet tumorutvikling, vekst og medikamentresistens. Videre er NCI-H460-celler en egnet modell for utvikling av kreftbekjempende midler.

NCI-H460-celler: Opprinnelse og generelle egenskaper

Opprinnelsen og de generelle egenskapene til en cellelinje har stor betydning for dens anvendelse i forskning. Denne delen av artikkelen vil hjelpe deg med å lære om opprinnelsen og de viktigste egenskapene til NCI-H460-lungekreftcellene. Du vil få vite: Hva er NCI-H460-celler? Hvilken type cellelinje er NCI-H460? Hva er morfologien til NCI-H460?

• NCI-H460-cellelinjen stammer fra pleural effusjon hos en europeisk mann med storcellet lungekreft. Den ble etablert i 1982 av A.F. Gazdar og kolleger.
• NCI-H460-lungekreftcellene har en epitelial morfologi.
• NCI-H460 er en tumorigenisk cellelinje med en hypotriploid karyotype. Det modale kromosomtall for disse cellene er 57. NCI-H460-celler har også 58 modale kromosomtall i tilsvarende frekvenser.
• Disse lungekreftcellene har mange NCI-H460-mutasjoner som ligner på ikke-småcellede lungesvulster, for eksempel NCI-H460 KRAS-mutasjonen, som er involvert i celleproliferasjon, vekst, invasjon og metastase.

CT-undersøkelsen av den middelaldrende pasienten viste en lungesvulst i venstre nedre lungelapp. Etter ytterligere undersøkelser ble det stilt diagnosen småcellet lungekreft (SCLC).

Informasjon om dyrking av NCI-H460-celler

Du bør kjenne til følgende viktige punkter for riktig håndtering og vedlikehold av NCI-H460-cellelinjen. Her får du informasjon om NCI-H460-doblingstid, NCI-H460-dyrkningsmedium og grunnleggende cellekulturprosedyrer for NCI-H460-lungekreftceller.

Viktige punkter for dyrking av NCI-H460-celler

Fordoblingstid:

Fordoblingstiden for NCI-H460 er omtrent 33 timer.

Adhærente eller i suspensjon:

NCI-H460-lungekreftcellene er vedheftende.

Subkultiveringsforhold:

Det anbefalte subkultiveringsforholdet for NCI-H460-cellelinjen er 1:2 og 1:4. Etter at det gamle mediet er fjernet, skylles de vedheftende cellene med 1 x fosfatbuffersaltvann. Deretter inkuberes cellene med Accutase-passasjeløsning i 8 til 10 minutter ved romtemperatur. De dissocierte cellene resuspenderes i et dyrkningsmedium og sentrifugeres. De høstede cellene resuspenderes på nytt og helles over i en ny kolbe for dyrking.

Vekstmedium:

RPMI 1640 brukes som NCI-H460-dyrkningsmedium. Det tilsettes 10 % føtalt bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin og 2,0 g/L NaHCO3. Mediet bør skiftes ut 2 til 3 ganger i uken.

Vekstbetingelser:

NCI-H460-kulturer holdes ved 37 °C i en fuktet inkubator med kontinuerlig tilførsel av 5 % CO₂.

Oppbevaring:

NCI-H460-lungekreftceller kan lagres i dampfasen av flytende nitrogen eller ved temperaturer under -150 °C i en elektrisk fryser for ultralave temperaturer for langvarig lagring.

Fryseprosess og medium:

CM-1- eller CM-ACF-medium brukes til å fryse ned og oppbevare NCI-H460-celler. En langsom frysemetode anbefales for å sikre maksimal celleviabilitet.

Tineprosess:

Frosne NCI-H460-celler tines i et forvarmet vannbad (ved 37 °C) i 40 til 60 sekunder, til det kun gjenstår en liten isklump. Tinte celler tilsettes ferskt medium og sentrifugeres for å fjerne komponenter fra frysemediet. Den oppsamlede cellepelleten resuspenderes på nytt, og cellene fordeles i nye kolber som inneholder medium for vekst. Det kan ta nesten 24 timer før NCI-H460-cellene fester seg til overflaten av kolben.

Biosikkerhetsnivå:

NCI-H460-lungekreftceller håndteres og oppbevares i laboratorier med biosikkerhetsnivå 1.

NCI-H460-celler som vokser sammen i vedheftende klynger, sett i 10x og 20x forstørrelse.

Publisert: 2023 | Sist gjennomgått: mai 2026

Fordeler og ulemper ved NCI-H460-celler

NCI-H460 er en mye brukt cellelinje i lungekreftforskning. Dette avsnittet vil omhandle de generelle fordelene og ulempene knyttet til NCI-H460-lungekreftceller.

Fordeler

Fordelene ved NCI-H460-cellelinjen for ikke-småcellet lungekreft er:

• Tumorens opprinnelse

  NCI-H460-cellelinjen stammer fra en pasient med storcellet lungekreft og representerer denne spesifikke lungekrefttypen. Den brukes som modell for å studere lungekreftbiologi og utvikle nye og effektive behandlinger. NCI-H460-celler har tumorigenisk potensial og kan injiseres i immunsvake mus for å skape in vivo-tumormodeller for å studere tumorvekst, utvikling og effekten av potensielle legemidler.

• Høye proliferasjonshastigheter

  NCI-H460 har høyere veksthastigheter enn andre cellelinjer for ikke-småcellet lungekreft, for eksempel A549. Denne fordelen øker tilgjengeligheten og hjelper forskere med å gjennomføre reproduserbare og tidsavhengige eksperimenter.

Ulemper

Ulempene ved NCI-H460-lungekreftcellene er:

• Homogenitet

  NCI-H460-cellene er homogene, da de stammer fra en enkelt pasienttumor. De mangler derfor generelt den kompleksiteten og heterogeniteten som observeres i pasienttumorer.

Forskningsanvendelser av NCI-H460-celler

NCI-H460-lungekreftcellene brukes i stor utstrekning i studier knyttet til lungekreft. Her er noen av de viktigste forskningsanvendelsene av NCI-H460-celler:

• Lungekreftforskning: NCI-H460-cellene er en uvurderlig modell for å undersøke celle- og molekylære mekanismer som er involvert i tumorutvikling, vekst og metastasering. Videre brukes de til å studere viktige signalveier, molekylære mål og ulike genetiske mutasjoner knyttet til utviklingen av lungekreft. Det er gjennomført flere studier på NCI-H460-celler for å undersøke disse faktorene grundig. En studie gjennomført i 2019 antydet at overekspressert nukleært ubikvitært kasein og substrat for syklinavhengige kinaser (NUCKS) er involvert i svulstcellevekst via regulering av PI3K/AKT-signalveien [1]. På samme måte benyttet en in vitro- og in vivo-studie NCI-H460-celler for å undersøke rollen til eIF4E-genet. Funnene viste at eIF4E-genet er involvert i vekst av lungekreft og angiogenese, og at det kan brukes som mål for utvikling av lovende legemidler mot lungekreft [2].
• Legemiddelutvikling: NCI-H460, en human lungekreftcellelinje, brukes mye i studier innen legemiddelutvikling. Forskere bruker disse cellene til å undersøke toksisiteten og effekten av nye legemiddelkandidater, målrettede terapier og behandlinger som hovedsakelig retter seg mot NCI-H460 KRAS-mutasjoner. I en studie utført av Haoyue Hu og kolleger i 2023 ble NCI-H460-celler brukt til å undersøke den krefthemmende effekten av legemidlet anlotinib. Resultatene viste at anlotinib delvis påvirket veksten av KRAS-muterte lungekreftceller ved å hemme MEK/ERK-signalkaskaden [3]. På samme måte ble en fenolforbindelse, karnoinsyre, undersøkt for antiproliferative og proapoptotiske egenskaper ved bruk av NCI-H460-celler [4].
• Legemiddelresistens: NCI-H460-cellelinjen er ideell for å studere mekanismen bak legemiddelresistens ved lungekreft. Forskere bruker disse cellene til å utvikle modeller for legemiddelresistens for å identifisere underliggende gener, molekylære faktorer og signalveier. For eksempel ble det i en studie utviklet pemetrexed, et multitargetet antifolatmiddel, mot resistente NCI-H460-celler for å studere de underliggende molekylære mekanismene for pemetrexed-resistens i ikke-småcellede lungekreftceller [5].

Kjøp NCI-H460-cellelinjen: Din inngangsport til lungekreftforskning

Forskningspublikasjoner om NCI-H460-celler

Her er noen interessante forskningspublikasjoner om lungekreftcellelinjen NCI-H460.

Et naturlig glukan fra svart bønne hemmer kreftcellers spredning via PI3K-Akt- og MAPK-signalveiene

Denne studien i tidsskriftet Molecules (2023) antydet at et naturlig α-1,6-glukan, BBWPW, fra svarte bønner hemmer spredningen av NCI-H460-celler ved å regulere PI3K/AKT/MAPK-signalveien.

Dioscin-6′-O-acetat hemmer spredningen av lungekreftceller ved å indusere cellecyklusstans og caspase-avhengig apoptose

Denne artikkelen i Phytomedicine (2019) undersøkte at dioscin-6′-O-acetat, et nytt naturlig stoff, utøver en antiproliferativ effekt på NCI-H460-lungekreftceller.

miRNA-425-5p fremmer veksten av lungekreft via PTEN/PI3K/AKT-signalaksen

Forskning publisert i BMC Pulmonary Medicine (2020) viser at mikroRNA-425-5p fremmer tumorigenese i lungekreft gjennom PTEN/PI3K/AKT-signalveien.

Quinalizarin har en antitumorvirkning på A549-lungekreftceller ved å modulere Akt-, MAPK-, STAT3- og p53-signalveiene

Denne artikkelen i Molecular Medicine Reports (2017) foreslo antitumorpotensialet og de underliggende mekanismene til quinalizarin-forbindelsen i NCI-H460 og andre lungekreftceller.

Avkoksekstrakt av Eucalyptus globulus Labill. hemmer veksten av NCI-H460-celler ved å øke p53-nivåene og endre cellecyklusprofilen

Denne studien i Food and Function (2019) belyser den potensielle antikrefteffekten av ekstrakt fra Eucalyptus globulus Labill. ved bruk av NCI-H460-celler. Funnene viste at planteekstraktet utøvde disse effektene ved å øke p53-ekspresjonen i NCI-H460-celler og modulere cellecyklusprofilen.

Ressurser for NCI-H460-cellelinjen: Protokoller, videoer og mer

Her er noen nettressurser om NCI-H460-lungekreftcellene.

• Transfeksjon av NCI-H460-celler: Denne videoopplæringen er en trinnvis veiledning for transfeksjon av NCI-H460-celler med plasmid-DNA.

Følgende lenker inneholder viktig informasjon om cellekultur for H460-celler. 

• NCI-H460-celler: Dette nettstedet gir viktig informasjon om NCI-H460-cellemedier, subkultivering, frysing og tining.
• Passering av NCI-H460-celler: Dette dokumentet vil veilede deg om passering og subkultivering av NCI-H460-cellelinjen. I tillegg vil det også hjelpe deg med å lære transfeksjonsprotokollen for NCI-H460-celler.

En nærmere titt på NCI-H460-cellelinjen: Vanlige spørsmål og innsikt

Referanser

1. Hu, C., et al., NUCKS fremmer proliferasjon, migrasjon og invasjon av lungekreftceller gjennom Pi3k/Akt-signalveien. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): s. E55-61.
2. Qi, X., et al., EGPI-1, en ny eIF4E/eIF4G-interaksjonshemmer, hemmer veksten av lungekreftceller og angiogenese gjennom Ras/MNK/ERK/eIF4E-signalveien. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: s. 109773.
3. Hu, H., et al., Anlotinib har krefthemmende effekter på KRAS-muterte lungekreftceller ved å undertrykke MEK/ERK-signalveien. Cancer Management and Research, 2020: s. 3579–3587.
4. Corveloni, A.C., et al., Karnosinsyre viser antiproliferative og proapoptotiske effekter i tumorale NCI-H460- og ikke-tumorale IMR-90-lungeceller. Journal of Toxicology and Environmental Health, del A, 2020. 83(10): s. 412–421.
5. Xu, Y.-L., et al., Etablering og karakterisering av pemetrexed-resistente NCI-H460/PMT-celler. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (tidligere Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): s. 731–739.