Przejdź do treści
C643
Chusteczka
Gruczoł tarczycy anaplastyczny
Choroba
Anaplastyczny rak tarczycy
Synonimy
C 643, C-643, c643

Dokumenty

C643

Cell line · Numer produktu 300298

Linia komórkowa C643 została wyhodowana przez Marka i wsp. w 1987 r. na podstawie próbki pobranej metodą biopsji cienkoigłowej z anaplastycznego raka tarczycy u 76-letniego mężczyzny. Pacjent...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa C643 została utworzona z biopsji cienkoigłowej anaplastycznego raka tarczycy 76-letniego mężczyzny przez Marka i wsp. w 1987 roku. Pacjent zmarł w ciągu 5 miesięcy od diagnozy. Wykazanie obecności mRNA tyreoglobuliny potwierdziło nabłonkowe pochodzenie linii komórkowej. Komórki C643 stały się cennym narzędziem do badań nad rakiem tarczycy.

Komórki te pochodzą z ludzkiej tkanki raka tarczycy i reprezentują przerzutowe PTC, FTC i ATC. Ich skład genetyczny odzwierciedla powszechne mutacje obserwowane w raku tarczycy, takie jak zmiany w genach BRAF, RAS i PI3K, które aktywują krytyczne szlaki sygnałowe.

Sprawia to, że komórki C643 są idealnym modelem do badania mechanizmów związanych z rozwojem i progresją raka tarczycy. Co więcej, komórki C643 są kluczowym zasobem do testowania potencjalnych terapii celowanych.

Ich włączenie do badań przedklinicznych może pomóc w identyfikacji i ocenie nowych związków, które są ukierunkowane na zmienione szlaki sygnałowe związane z rakiem tarczycy. Dzięki dokładnemu odwzorowaniu ludzkiego raka tarczycy, komórki C643 przyczyniają się do opracowania skuteczniejszych metod leczenia pacjentów z zaawansowanym rakiem tarczycy.

Chusteczka
Gruczoł tarczycy anaplastyczny
Choroba
Anaplastyczny rak tarczycy
Synonimy
  • C 643
  • C-643
  • c643

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy

04Identyfikatory

Źródło
C643 (numer katalogowy Cytion 300298)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5969

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2 utworzy zlewającą się warstwę w ciągu około 3 dni.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
76 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski