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C643
Gewebe
Schilddrüse anaplastisch
Krankheit
Anaplastisches Schilddrüsenkarzinom
Synonyme
C 643, C-643, c643

Dokumente

C643

Cell line · Artikelnummer 300298

Die Zelllinie C643 wurde 1987 von Mark et al. aus einer Feinnadelbiopsie eines anaplastischen Schilddrüsenkarzinoms eines 76-jährigen Mannes etabliert. Der Patient ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie C643 wurde 1987 von Mark et al. aus einer Feinnadelbiopsie eines anaplastischen Schilddrüsenkarzinoms eines 76-jährigen Mannes gewonnen. Der Patient starb innerhalb von 5 Monaten nach der Diagnose. Durch den Nachweis von Thyreoglobulin-mRNA konnte ein schilddrüsenepithelialer Ursprung der Zelllinie festgestellt werden. Die C643-Zellen erweisen sich als wertvolles Instrument für die Schilddrüsenkrebsforschung.

Diese Zellen stammen aus menschlichem Schilddrüsenkrebsgewebe und repräsentieren metastatische PTC, FTC und ATC. Ihr genetischer Aufbau spiegelt die bei Schilddrüsenkrebs häufig beobachteten Mutationen wider, wie z. B. Veränderungen in BRAF-, RAS- und PI3K-Genen, die wichtige Signalwege aktivieren.

Dies macht C643-Zellen zu einem idealen Modell für die Untersuchung der Mechanismen, die an der Entstehung und dem Fortschreiten von Schilddrüsenkrebs beteiligt sind. Darüber hinaus sind C643-Zellen eine wichtige Ressource für die Prüfung potenzieller zielgerichteter Therapien.

Ihre Einbeziehung in präklinische Studien kann dazu beitragen, neue Wirkstoffe zu identifizieren und zu bewerten, die speziell auf die veränderten Signalwege abzielen, die bei Schilddrüsenkrebs eine Rolle spielen. Indem sie den menschlichen Schilddrüsenkrebs genau repräsentieren, tragen C643-Zellen zur Entwicklung wirksamerer Behandlungen für Patienten mit fortgeschrittenem Schilddrüsenkrebs bei.

Gewebe
Schilddrüse anaplastisch
Krankheit
Anaplastisches Schilddrüsenkarzinom
Synonyme
  • C 643
  • C-643
  • c643

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
C643 (Cytion-Katalognummer 300298)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_5969

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm² ergeben in etwa 3 Tagen eine konfluente Schicht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
76 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch