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C643
Tessuto
Ghiandola tiroidea anaplastica
Malattia
Carcinoma anaplastico della tiroide
Sinonimi
C 643, C-643, c643

Documenti

C643

Cell line · Codice prodotto 300298

La linea cellulare C643 è stata isolata da una biopsia con ago sottile di un carcinoma tiroideo anaplastico di un uomo di 76 anni da Mark et al. nel 1987. Il paziente...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare C643 è stata creata da Mark et al. nel 1987 a partire da una biopsia ad ago fine di un carcinoma anaplastico della tiroide di un uomo di 76 anni. Il paziente è morto entro 5 mesi dalla diagnosi. La dimostrazione dell'mRNA della tireoglobulina ha accertato l'origine epiteliale tiroidea della linea cellulare. Le cellule C643 emergono come uno strumento prezioso per la ricerca sul cancro della tiroide.

Queste cellule provengono da tessuto di cancro della tiroide umano e rappresentano PTC, FTC e ATC metastatici. La loro composizione genetica riflette le mutazioni comuni osservate nel cancro della tiroide, come le alterazioni nei geni BRAF, RAS e PI3K, che attivano vie di segnalazione critiche.

Ciò rende le cellule C643 un modello ideale per studiare i meccanismi coinvolti nello sviluppo e nella progressione del cancro della tiroide. Inoltre, le cellule C643 sono una risorsa cruciale per testare potenziali terapie mirate.

La loro inclusione negli studi preclinici può aiutare a identificare e valutare nuovi composti che mirano specificamente alle vie di segnalazione alterate implicate nel cancro della tiroide. Rappresentando accuratamente il carcinoma tiroideo umano, le cellule C643 contribuiscono a sviluppare trattamenti più efficaci per i pazienti con carcinoma tiroideo avanzato.

Tessuto
Ghiandola tiroidea anaplastica
Malattia
Carcinoma anaplastico della tiroide
Sinonimi
  • C 643
  • C-643
  • c643

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
C643 (numero di catalogo Cytion 300298)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5969

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 produrrà uno strato confluente in circa 3 giorni
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
76 anni
Etnia
Caucasico