Przejdź do treści
Human Dental Follicle stem cells (DFSC, hDFSC)
Chusteczka
Stomatologia

Dokumenty

Human Dental Follicle stem cells (DFSC, hDFSC)

Cell line · Numer produktu 300701

Human Dental Follicle Stem Cells (DFSCs, hDFSCs) are a type of mesenchymal stem cell (MSC) derived from the dental follicle, an ectomesenchymal tissue sur...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Ludzkie komórki macierzyste mieszka zębowego (DFSC, hDFSC) to rodzaj mezenchymalnych komórek macierzystych (MSC) pochodzących z mieszka zębowego, ektomezenchymalnej tkanki otaczającej rozwijający się zarodek zęba. Komórki te są szczególnie interesujące w medycynie regeneracyjnej ze względu na ich multipotencjalne zdolności, co oznacza, że mogą różnicować się w różne typy komórek, w tym osteoblasty (komórki kościotwórcze), chondrocyty (komórki chrząstki), adipocyty (komórki tłuszczowe) i prawdopodobnie komórki nerwowe. Komórki DFSC są zazwyczaj pobierane z mieszków zębowych wyrzniętych trzecich zębów trzonowych (zębów mądrości) i są cenione za łatwą dostępność i minimalne obawy etyczne w porównaniu z innymi źródłami komórek macierzystych.

DFSC wykazują kilka kluczowych właściwości, które czynią je obiecującymi do zastosowań terapeutycznych. Posiadają silne zdolności proliferacyjne, zachowując zdolność do samoodnawiania przez dłuższy czas hodowli. Co więcej, mają one znaczną zdolność do migracji i osiedlania się w miejscach urazów, co zwiększa ich potencjał do wykorzystania w inżynierii tkankowej i naprawach. DFSC wydzielają również szereg czynników bioaktywnych, które przyczyniają się do ich działania immunomodulującego, co czyni je cennymi w leczeniu stanów zapalnych.

Badania nad DFSC wykazały ich potencjał w inżynierii tkanek zęba, szczególnie w regeneracji tkanek przyzębia, miazgi i kości. Dodatkowo, ich różnicowanie w komórki neuronopodobne otwiera drogę do zastosowań neurologicznych. Pomimo obiecujących atrybutów DFSC, konieczne są dalsze badania, aby w pełni zrozumieć ich ścieżki różnicowania, zoptymalizować warunki hodowli oraz potwierdzić ich długoterminowe bezpieczeństwo i skuteczność w warunkach klinicznych.

Chusteczka
Stomatologia

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
Ludzkie komórki macierzyste pęcherzyka zębowego (DFSC, hDFSC) (numer katalogowy Cytion 300701)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606

04Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w/o: Rybonukleozydy, w/o: Deoksyrybonukleozydy, w: 1.0 mM Pirogronian sodu, w: 2.2g/L NaHCO3
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 2 ng/ml bFGF
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
2 x 104 komórek/cm2
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 90% FBS + 10% DMSO w celu utrzymania żywotności lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), który zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.