Mine otse sisu juurde
Human Dental Follicle stem cells (DFSC, hDFSC)
Kude
Hambaravi

Dokumendid

Human Dental Follicle stem cells (DFSC, hDFSC)

Cell line · Toote number 300701

Human Dental Follicle Stem Cells (DFSCs, hDFSCs) are a type of mesenchymal stem cell (MSC) derived from the dental follicle, an ectomesenchymal tissue sur...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Inimese hambafolliikulite tüvirakud (DFSC, hDFSC) on mesenhümaalsete tüvirakkude (MSC) tüüp, mis on saadud hambafolliikulist, ektomesenhümaalsest koest, mis ümbritseb arenevat hamba idu. Need rakud pakuvad erilist huvi regeneratiivses meditsiinis nende multipotentsete võimete tõttu, mis tähendab, et nad võivad diferentseeruda erinevateks rakutüüpideks, sealhulgas osteoblastideks (luu moodustamise rakud), kondrotsüütideks (kõhre moodustamise rakud), adipotsüütideks (rasvarakud) ja tõenäoliselt ka närvirakkudeks. DFSCd saadakse tavaliselt hammaste folliikulitest, mis on tekkinud kolmandatest molaaridest (tarkusehammastest), ning neid hinnatakse nende kerge kättesaadavuse ja minimaalsete eetiliste probleemide tõttu võrreldes teiste tüvirakuallikatega.

DFSC-del on mitmeid põhiomadusi, mis muudavad need paljulubavaks terapeutilisteks rakendusteks. Neil on tugev proliferatsioonivõime, mis säilitab nende iseenesliku uuenemisvõime pikema aja jooksul. Lisaks sellele on neil märkimisväärne võime migreeruda ja asuda vigastuskohtadesse, mis suurendab nende potentsiaali koetehnoloogias ja -paranduses. DFSCd eritavad ka mitmesuguseid bioaktiivseid faktorid, mis aitavad kaasa nende immunomoduleerivale toimele, mis muudab nad väärtuslikuks põletikuliste seisundite ravis.

DFSC-de uurimine on näidanud nende potentsiaali hambaravikoetehnoloogias, eriti parodontiumi kudede, pulpa ja luu taastamisel. Lisaks sellele avab nende diferentseerumine närvisüsteemi sarnasteks rakkudeks võimalusi neuroloogilisteks rakendusteks. Hoolimata DFSC-de paljulubavatest omadustest on vaja täiendavaid uuringuid, et täielikult mõista nende diferentseerumisviise, optimeerida kasvatustingimusi ning kinnitada nende pikaajalist ohutust ja tõhusust kliinilises keskkonnas.

Kude
Hambaravi

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
Inimese hambumusfolliikulite tüvirakud (DFSC, hDFSC) (Cytioni katalooginumber 300701)
NCBI maksukood
9606

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w/o: Ribonukleosiidid, w/o: Deoksüribonukleosiidid, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 2 ng/ml bFGF
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 x 104 rakku/cm2
Sulatamine ja kasvatamine

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimise keskkonda kasutame 90% FBS + 10% DMSO elujõulisuse säilitamiseks või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.