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Human Dental Follicle stem cells (DFSC, hDFSC)
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Human Dental Follicle stem cells (DFSC, hDFSC)

Cell line · Número de producto 300701

Human Dental Follicle Stem Cells (DFSCs, hDFSCs) are a type of mesenchymal stem cell (MSC) derived from the dental follicle, an ectomesenchymal tissue sur...

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01Información general

Descripción

Las células madre del folículo dental humano (DFSC, hDFSC) son un tipo de células madre mesenquimales (MSC) derivadas del folículo dental, un tejido ectomesenquimal que rodea el germen del diente en desarrollo. Estas células son de especial interés en medicina regenerativa por su capacidad multipotencial, lo que significa que pueden diferenciarse en varios tipos celulares, como osteoblastos (células formadoras de hueso), condrocitos (células formadoras de cartílago), adipocitos (células adiposas) y, posiblemente, células neurales. Las DFSC suelen obtenerse de los folículos dentales de los terceros molares impactados (muelas del juicio) y se valoran por su facilidad de acceso y sus mínimos problemas éticos en comparación con otras fuentes de células madre.

Las DFSC presentan varias propiedades clave que las hacen prometedoras para aplicaciones terapéuticas. Poseen una gran capacidad proliferativa y mantienen su capacidad de autorrenovación durante largos periodos de cultivo. Además, tienen una notable capacidad para migrar y establecerse en zonas lesionadas, una característica que aumenta su potencial para su uso en ingeniería y reparación de tejidos. Las DFSC también segregan una serie de factores bioactivos que contribuyen a sus efectos inmunomoduladores, lo que las hace valiosas para el tratamiento de enfermedades inflamatorias.

La investigación sobre las DFSC ha demostrado su potencial en la ingeniería de tejidos dentales, sobre todo en la regeneración de tejidos periodontales, pulpa y hueso. Además, su diferenciación en células similares a las neuronales abre vías para aplicaciones neurológicas. A pesar de los prometedores atributos de las DFSC, son necesarios más estudios para comprender plenamente sus vías de diferenciación, optimizar las condiciones de cultivo y confirmar su seguridad y eficacia a largo plazo en entornos clínicos.

Pañuelo de papel
Dental

02Clasificación

Organismo
Humano
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Identificadores

Referencia
Células madre del folículo dental humano (DFSC, hDFSC) (número de catálogo 300701 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606

04Manejo y cultivo

Medio de cultivo
MEM alfa, con: 2,0 mM de glutamina estable, sin Ribonucleósidos, w/o: Desoxirribonucleósidos, w: 1,0 mM Piruvato sódico, w: 2,2g/L NaHCO3
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% FBS, 2 ng/mL bFGF
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
2 x 104 células/cm2
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos FBS al 90% + DMSO al 10% para mantener la viabilidad, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.