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Células JEG-3
Tecido
Placenta
Doença
Coriocarcinoma
Local da metástase
Cérebro
Sinónimos
Jeg-3, JEG3, Jeg3, jeg3

Documentos

Células JEG-3

Cell line · Número do produto 300222

A linha celular JEG-3 é derivada de um coriocarcinoma humano, um tipo de cancro que tem origem nas células trofoblásticas da placenta. Estas células apresentam...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular JEG-3 é derivada de um coriocarcinoma humano, um tipo de cancro que tem origem em células trofoblásticas da placenta. Estas células apresentam propriedades caraterísticas dos trofoblastos, incluindo a capacidade de produzir hormonas como a gonadotropina coriónica humana (hCG), que é crucial para a manutenção da gravidez. As células JEG-3 são de natureza epitelial e são frequentemente utilizadas em investigação centrada na função placentária, na biologia do cancro e na sinalização endócrina.

As células JEG-3 são conhecidas pelas suas caraterísticas de crescimento agressivo e pela sua capacidade de invadir os tecidos circundantes, o que as torna um modelo valioso para o estudo dos mecanismos de invasão e metástase dos tumores trofoblásticos. Além disso, têm sido amplamente utilizadas em investigação sobre as vias moleculares envolvidas no desenvolvimento da placenta, bem como sobre o papel dos trofoblastos na tolerância imunitária durante a gravidez. As células são normalmente cultivadas em meio RPMI-1640 suplementado com soro fetal bovino e outros factores de crescimento para apoiar a sua proliferação e manutenção.

Esta linha celular constitui uma plataforma robusta para investigar a biologia do cancro da placenta, a produção de hormonas e a interação entre os trofoblastos e o sistema imunitário materno.

Tecido
Placenta
Doença
Coriocarcinoma
Local da metástase
Cérebro
Aplicações
Hospedeiro de transfecção
Sinónimos
  • Jeg-3
  • JEG3
  • Jeg3
  • jeg3

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Forma um tumor maligno consistente com o coriocarcinoma
Tempo de duplicação
36 horas

04Identificadores

Referência
JEG-3 (número de catálogo Cytion 300222)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0363

05Expressão e suscetibilidade

Isoenzimas
PGM3, 1-2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, tipo B
Produtos
HCG, somatomamotrofina coriónica humana (lactogénio placentário), progesterona.

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
2 x 104 células/cm² resultarão numa monocamada confluente dentro de 2 a 3 dias.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Deixar as células recuperarem do processo de congelação durante 24 a 48 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Feto