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SNU-423
Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular do adulto
Sinónimos
SNU423, NCI-SNU-423

Documentos

SNU-423

Cell line · Número do produto 305874

A linha celular SNU-423 é um modelo de carcinoma hepatocelular humano (CHC) estabelecido a partir de um doente adulto coreano. É uma das oito linhas celulares de CHC derivadas de...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular SNU-423 é um modelo de carcinoma hepatocelular humano (CHC) estabelecido a partir de um doente adulto coreano. É uma das oito linhas celulares de CHC derivadas de tumores hepáticos primários e caracterizadas pelas suas propriedades morfológicas, genéticas e virológicas. A SNU-423 apresenta aderência ao substrato e mantém muitas das caraterísticas histológicas do tumor original, consistentes com a morfologia epitelial derivada de hepatócitos. Apresenta aneuploidia e tem um número cromossómico modal indicativo de instabilidade cromossómica, o que é comum em linhas derivadas de CHC.

A nível molecular, a SNU-423 é notável pela integração do ADN do vírus da hepatite B (VHB) no seu genoma, uma caraterística partilhada por todas as linhas da sua coorte, reflectindo a elevada prevalência de cancro do fígado associado ao VHB na Ásia Oriental. Embora algumas linhas celulares da série expressem transcritos do VHB, como o HBVx, não foi registada a expressão de transcritos específicos na SNU-423. Além disso, a SNU-423 não exprime a alfa-fetoproteína (AFP) ao nível do ARN ou da proteína, o que a alinha com um subconjunto de CHC sem secreção de AFP. Tem sido utilizado em exames farmacogenómicos como o LIMORE (Liver Cancer Model Repository), onde contribui para a compreensão das associações gene-fármaco no cancro do fígado, incluindo a variabilidade da resposta aos medicamentos potencialmente ligada ao estado do VHB ou a alterações oncogénicas distintas.

Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular do adulto
Sinónimos
  • SNU423
  • NCI-SNU-423

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Cariótipo
Aneuploide; número modal = 79
Tempo de duplicação
72 horas

04Identificadores

Referência
SNU-423 (número de catálogo Cytion 305874)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0366

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Tipo de sangue B; Rh +
Perfil mutacional
Mutação: TERT, Simples, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T), Não especificado, Nota=No promotor. Mutação, TP53, Simples, c.376-2A>G, Não especificado, Nota=Mutação no aceitador de splicing

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS inactivado pelo calor
Reagente de dissociação
Accutase
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
40 anos
Etnia
Coreano